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[求助]细胞瓶底有贴壁小亮点
[求助]细胞瓶底有贴壁小亮点
最近养细胞,刚复苏和最开始的2、3代状态挺好的,再传代就开始有点漂,并且有贴壁的小亮圆点和细胞一起长。后来细胞不漂了,还是有很密的小亮点。很亮,并且边缘规则。如何避免这种情况呢?还能消除吗?
还有一个问题:什么是细胞沙化?像我养的细胞的情况是细胞沙化吗?
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-3-24 12:59 作者: u234 来源: 分析测试百科网
最新回复
u234 (2012-3-24 13:00:44)
应该不是细菌,培养基不是很快变黄,并且小亮点是贴壁的,不会动,但能消化下来。
99652935.snap.jpg
缘yuan (2012-3-24 13:01:55)
见过的类似情况要么是真菌污染 要么是细胞凋亡太多形成的凋亡小体
要是小亮点连成串珠状 肯定是真菌污染,要是散开大小不一有可能是凋亡小体, 一般细菌污染看不到小亮点,细菌没那么大 大肠杆菌镜下看起来就是些很微小的黑丝
缘yuan (2012-3-24 13:02:22)
如果你的图片上显示的连在一起那种小点不是你的细胞, 那肯定是真菌污染了 真菌污染很麻烦 双抗搞不的
dragonkilly (2012-3-24 13:02:46)
lz,我也遇到了和你类似的情况~
复苏了以前冻存的细胞,刚开始状态还不错,等传了一代后就出问题了,生长速度很缓慢,部分地方由于细胞死亡而形成空白,培养液表面漂浮了很多透明远点,但是好像不是成念珠连在一起。
求问达人们到底是什么情况
晚上有时间了上几张图~
wu11998866 (2012-3-24 13:03:38)
感觉小亮点是贴壁的,晃动培养瓶小亮点不会跟着动,能够被消化下来,不连在一起,是散开的。我们养了5种细胞,其中2种出现了这种情况,其他的还一直没事。
wu11998866 (2012-3-24 13:04:13)
连在一起、大的是SW620细胞,背景中很多小的亮点不知是咋回事。
ha111 (2012-3-24 13:04:50)
guagua (2012-3-24 13:05:18)
应该是污染了,我以前也养过这样的。冻存前是好的,复苏后就出现污染的情况。
小螺号 (2012-3-24 13:05:40)
你就多养几天,细菌污染一般三天培养基就会变得混浊,而且在显微镜下可以观察到细菌在动。常见的真菌一般要比你养的细胞小,像真菌白色念珠球菌和你描述的亮点应该差不多大小,刚开始是小棒状或是椭圆的,分裂时会拉长,串状..,且静止不动。
如果比较分散,如楼上的一位兄弟所说,是凋亡小体,反光度很高,细胞凋亡是程序性死亡,如果你里面有巨噬细胞的话,可以看到小亮点会着附在巨噬细胞上,板底干净,各细胞生长良好。
细胞凋亡早期会形成一些“芽体”,是内质网不断扩张并与胞膜融合,形成膜表面的芽状突起,称为出芽,比后期形成的凋亡小体要大,所以你最好看看有没有个别介于细胞和小亮点之间的“亮点”。
3648755 (2012-3-24 13:07:45)
细菌污染的话,培养液会很快变浑变黄,楼主的细胞不排除支原体感染
小螺号 (2012-3-24 13:09:02)
是啊,且支原体污染一般很难看到培养基变浑浊,但是细胞会慢慢的死去。支原体光学显微镜下也很难看到,支原体太小了,一般染色才能确定。
阿敏 (2012-3-24 13:09:29)
建议楼主换培养液试下,看看是否还有这样的小亮点。之前请我们养的细胞也出现过类似的情况,换了几次培养液以后就慢慢的消失,具体的原因还不是很清楚。
fei1226com (2012-3-24 13:10:49)
这个图片显示细胞状态不太正常,我养过sw620和sw480细胞,前者是有部分呈圆形状态,但是无论如何也应该有贴壁伸展状态的细胞,图片里好像看不见,另外,图片中有些小圆点肯定是不正常状态,我养的这个细胞没见过这类状况,实验人员最好重新复苏细胞再试试。
小螺号 (2012-3-24 13:11:07)
jrwyyplt (2012-3-24 13:11:23)
是不是酵母污染啊
remenb (2012-3-24 13:12:47)
我养人的BMSCs,如果志愿者的年龄很大,分出的细胞养了一段时间后就会出现细胞形态很宽大,细胞之间的分界不是很明显,镜下见细胞内似乎有小颗粒,开始以为是污染了,但是接着养也不会有培养基变黄灯现象。细胞生长较慢。
养鼠的BMSCs时出现过开始时很好,后来出现类似的情况。有人说是细胞老化,也没找到细胞老化是怎么一回事。
楼主提到沙化,不知道是不是我遇到的这种情况,借楼主宝地,盼高人解答。
33号 (2012-3-24 13:13:45)
你用的培养平板还是克隆瓶?
any333 (2012-3-24 13:14:15)
我觉得最可能还是支原体感染。
支原体感染的细胞最后看起来都差不多。晚期凋亡或死亡的样子。细胞间很多黑点,调焦过程中也可以显示成亮点。
remenb (2012-3-24 13:14:53)
我养的细胞也有这种问题,组织块旁边总有很多亮亮的小点,有的培养瓶里组织块还能爬出细胞,有的完全长不出细胞。换液后仍然有,不知道什么原因。
eric930 (2012-3-24 13:15:54)
瞧着像是真菌感染了,它是浮于贴壁细胞之上的。可以多观察几日,培养液是否变浑,或者贴壁细胞的变化。请在三天,再扫个片,传上来,告诉我们结果。
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