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标题:[未解决]将这2种蛋白分开呢?求指点~

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
花花[使用道具]
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将这2种蛋白分开呢?求指点~

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我有2种蛋白,分子量一个是5KD,等电点为4.2;一个为35KD,等电点为6.5,总的蛋白体积较大。请问有什么办法能够经济有效得,将这2种蛋白分开呢?求指点~
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读过书的[使用道具]
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阴离子交换柱层析,因为等电点差很远,而且填料可以买很普通的。
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fantacy[使用道具]
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我觉得分子量差距很大,可以尝试用SDS-PAGE 祝你实验顺利~
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hey_bye[使用道具]
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应该利用层析柱,具体的懂不太多,但是为了高效的分离层析肯定是最好的。2楼的建议应该参考。另外等电点都相差2.3了还不大么?
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青青子衿[使用道具]
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分子量差这么多,显然用分子筛啊 可以用阴离子交换层析  这个等电点还是有差距的
或者楼主试试超滤?用个10K的超滤管试试?
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兜兜[使用道具]
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不管你是实验室的分离还是生产上的分离,个人感觉超滤比较好
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mr.henry[使用道具]
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使用20-30kD的浓缩管,上面是大的,流下来的是小的
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娜爷~[使用道具]
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凝胶过滤层析GFC选择Sephedex G-100或G-150可以分离。
祝你实验顺利~
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小书虫[使用道具]
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楼主的情况,应该使用阴离子交换,好处是可以将一种蛋白质挂柱浓缩,另外一种穿出,综合下一步进行SP层析,应该可以将两种蛋白分离;
楼上有战友建议使用超滤、SDS-PAGE、分子筛等等;
先说超滤,超滤对于线性蛋白效果很差,很难将两种蛋白分离开来;
SDS-PAGE仅仅适用于小样品量的制备,对于需要制备量稍大一点的,基本无用。
分子筛分离方法倒是可以,但存在的问题是样品的稀释问题,获得的样品被稀释3-5倍。
以上建议,希望有帮助
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Kiwi2021[使用道具]
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我觉得分子量差距很大,可以尝试用SDS-PAGE 祝你实验顺利~  https://1687660.com/view/uklotto8/klsf_index.html
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