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【求助】一抗保存问题
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发表于: 2014-4-15 22:08 作者: utt0989 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
【求助】一抗保存问题
新手请教:1.买来的抗体如何分装?
2.从以往的帖子得知,一抗稀释后保存需加防腐剂,我们实验室有二甲亚砜,它是用于防腐的吗?如果是,需要多大的浓度呀?
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【求助】一抗保存问题
我也来说两句
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DNA
(2014-4-15 22:08:22)
DMSO是助溶剂,好象不用于防腐,抗体防腐用叠氮钠,终浓度0.09%.
彼岸花opp
(2014-4-15 22:08:49)
一抗买来千万别全稀释,你啊用多少先稀释多少,剩下的接着按保存温度保存,另外吸一抗的枪头,存一抗的管子一定灭过菌再用,否则你的一抗可能就喂细菌了。
utt0989
(2014-4-15 22:09:22)
还得灭菌呀!这我还真不知道,多谢指导,要不然结果就惨了Sad
pengke1983
(2014-4-15 22:09:48)
一抗买来的分装问题应该在抗体说明书上标明了。我买的一抗就严禁分装,而我们隔壁实验室他们的抗体就是分装过的。这个要看说明书的。
pengke1983
(2014-4-15 22:11:37)
请问你说的“另外吸一抗的枪头,存一抗的管子一定灭过菌再用,”是用高压灭菌还是紫外灭菌?
了了
(2014-4-15 22:12:18)
当然是高压灭菌了
伊莎贝拉
(2014-4-15 22:12:47)
没有那么严重的,只要4度保存好了就没事。每次取液都用新tip就行。抗体一般有效期就是1年,过期也没用了。
u76mp
(2014-4-15 22:14:20)
MS我们实验室的枪头都是高压后再用的。
另外,叠氮钠终浓度只要0.02%就可以了。我一般是配成10%的浓度,然后用的时候每ml加2ul.
utt0989
(2014-4-15 22:14:37)
叠氮钠用什么液体配的呀?它保存需要什么条件呀,有特殊要求吗?
hold住
(2014-4-15 22:15:11)
一抗买来的分装问题应该在抗体说明书上标明了。我买的一抗就严禁分装,而我们隔壁实验室他们的抗体就是分装过的。这个要看说明书的。
=============================================
严禁分装是为什么?那不是每次用都要拿出来解冻一下?
yayya
(2014-4-15 22:15:34)
说明书上这样写的,Do not aliquot the antibody.
yayya
(2014-4-15 22:17:50)
抗体里面加的有甘油,这样可以保持抗体在-20度保存的时候仍然处于液态,所以每次取的时候可以直接取出,不用等抗体解冻。
duoduo
(2014-4-15 22:18:07)
可以加入等体积80%甘油
在-20度下是不会结冰的也就不存在冻融问题
制备的抗血清也可以这样保存
有些商业抗体本身就是加有甘油的
dreaming
(2014-4-15 22:18:24)
应根据说明书来进行保存
若说明书讲的不清楚
也可咨询抗体的销售或生产公司
应能得到更为具体的指导
newway
(2014-4-15 22:18:42)
没有那么严重的,只要4度保存好了就没事。每次取液都用新tip就行。抗体一般有效期就是1年,过期也没用了。
我的个人经验.大部分的抗体能够应用3年,当然效价可能降低.
xueyouzhang
(2014-4-15 22:19:43)
新买来的抗体可以先分装到0.5ml EP管中,这样就避免反复冻融。我们实验室很多种抗体稀释后放-20度,不需要加防腐剂的,可以反复用很多次,直到你认为信号不太灵敏,抗体个体差异很大,一般4,5次是没有问题的。我有一种抗体都用来20次了还很好用。我用来稀释抗体的管子是没有灭过菌的,没有那么严重会养菌。说明书上会很详细地告诉你稀释和保存方法的。
milkdog
(2014-4-15 22:20:43)
是要根据说明书来操作的。我的一抗要求保存在4度,不纯在反复冻融的问题,就没有分装。如果是要求保存在-20度的,还是分装一下好。抗体是蛋白质,反复冻融当然不好。
avi317
(2014-4-15 22:21:07)
很多要求4度保存的一抗都含有防腐剂,tips不需要灭菌。
vivian4123
(2014-4-15 22:21:29)
装抗体的管子是特制的,所以不要随便分装。
eric930
(2014-4-15 22:22:05)
一抗有必要加防腐剂,加硫柳汞也很好,也需要分装,一旦污染就不能用了
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【求助】一抗保存问题
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DNA (2014-4-15 22:08:22)
彼岸花opp (2014-4-15 22:08:49)
utt0989 (2014-4-15 22:09:22)
还得灭菌呀!这我还真不知道,多谢指导,要不然结果就惨了Sad
pengke1983 (2014-4-15 22:09:48)
一抗买来的分装问题应该在抗体说明书上标明了。我买的一抗就严禁分装,而我们隔壁实验室他们的抗体就是分装过的。这个要看说明书的。
pengke1983 (2014-4-15 22:11:37)
了了 (2014-4-15 22:12:18)
当然是高压灭菌了
伊莎贝拉 (2014-4-15 22:12:47)
u76mp (2014-4-15 22:14:20)
MS我们实验室的枪头都是高压后再用的。
另外,叠氮钠终浓度只要0.02%就可以了。我一般是配成10%的浓度,然后用的时候每ml加2ul.
utt0989 (2014-4-15 22:14:37)
叠氮钠用什么液体配的呀?它保存需要什么条件呀,有特殊要求吗?
hold住 (2014-4-15 22:15:11)
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严禁分装是为什么?那不是每次用都要拿出来解冻一下?
yayya (2014-4-15 22:15:34)
说明书上这样写的,Do not aliquot the antibody.
yayya (2014-4-15 22:17:50)
duoduo (2014-4-15 22:18:07)
在-20度下是不会结冰的也就不存在冻融问题
制备的抗血清也可以这样保存
有些商业抗体本身就是加有甘油的
dreaming (2014-4-15 22:18:24)
应根据说明书来进行保存
若说明书讲的不清楚
也可咨询抗体的销售或生产公司
应能得到更为具体的指导
newway (2014-4-15 22:18:42)
没有那么严重的,只要4度保存好了就没事。每次取液都用新tip就行。抗体一般有效期就是1年,过期也没用了。
我的个人经验.大部分的抗体能够应用3年,当然效价可能降低.
xueyouzhang (2014-4-15 22:19:43)
新买来的抗体可以先分装到0.5ml EP管中,这样就避免反复冻融。我们实验室很多种抗体稀释后放-20度,不需要加防腐剂的,可以反复用很多次,直到你认为信号不太灵敏,抗体个体差异很大,一般4,5次是没有问题的。我有一种抗体都用来20次了还很好用。我用来稀释抗体的管子是没有灭过菌的,没有那么严重会养菌。说明书上会很详细地告诉你稀释和保存方法的。
milkdog (2014-4-15 22:20:43)
avi317 (2014-4-15 22:21:07)
vivian4123 (2014-4-15 22:21:29)
装抗体的管子是特制的,所以不要随便分装。
eric930 (2014-4-15 22:22:05)
【求助】一抗保存问题