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【求助】抗体保存
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发表于: 2014-5-29 17:30 作者: 莓菓333 来源: 分析测试百科网
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【求助】抗体保存
我的WB抗体,不慎被放入-20,请问还能用吗?是国内分装的santa的,急啊,都快疯了
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【求助】抗体保存
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yjf1026
(2014-5-29 17:30:49)
应该可以用的.
你用时从冰箱里拿出来,看一下万一有沉淀或者浑浊物,等恢复到室温如果没有沉淀或者浑浊物,那就可以放心使用
owanaka
(2014-5-29 17:31:09)
可以的,我以前做WB,和EMSA的时候犯过同样的错误,不过解冻后做试验仍然有结果!!!
lgm
(2014-5-29 17:31:27)
santa 的抗体没有冷冻保护剂,因此建议放在4度,拿出来时记得放在4度缓慢升温,避免反复冻融,不过短时间内放在负20度对抗体的效价影响也不是很大
莓菓333
(2014-5-29 17:31:50)
谢谢大家,早晨发现时,我都快疯了,都是那天太忙,我们的冰箱,旧的是上边-20,下边4,新的正好相反,谢谢各位,另外今天有发现一个问题,请教:一般1抗,二抗用什么稀释,我买的中山分装的二抗,说明是1:5000-1:10000,做ELASA/WB,我直接把稀释的1:1000的二抗和DAB反应,无色,最好,直接滴加二抗原液,才出现很微弱的棕色,请问,是不是这个二抗效价有问题?
mod=8048
(2014-5-29 17:32:19)
抗体用封闭液稀释即可,如BSA等,如你直接加HRP二抗 原液 ,如能确保DAB 没有问题,那么只能说明你的二抗有问题
yueban-1147
(2014-5-29 17:34:43)
抗体用封闭液稀释即可,如BSA等,如你直接加HRP二抗 原液 ,如能确保DAB 没有问题,那么只能说明你的二抗有问题
gogo
(2014-5-29 17:35:03)
二抗用封闭液稀释既可,抗体操作特别要注意温度要求,千万不要太高!
woshiduiyan
(2014-5-29 17:35:21)
用5%的脱脂牛奶就可以了
莓菓333
(2014-5-29 17:35:39)
谢谢各位,再弱弱的问,抗体用封闭液稀释,那么配置这个封闭液有什么特别的要求?比如水质,无菌?
hold住
(2014-5-29 17:35:55)
如果做WB,并不严格要求无菌,水质一般用去离子水,封闭液用脱脂牛奶或BSA,注意现用现配的好
guokezi
(2022-7-21 15:53:29)
如果有沉淀的话怎么办,我碰过过,做出来测值偏低,有时候也会偏高,它的保存液里面只有PBS、叠氮钠。所以这个沉淀是抗体吗
chenzhen2016
(2023-7-08 16:38:12)
一般情况下,WB抗体在-20°C的冷冻条件下是可以保持稳定的。但是,如果WB抗体被放入-20°C的冷冻库存中,需要注意以下几点:
快速恢复:尽快将抗体从-20°C转移到-80°C或更低的温度,以减少潜在的蛋白质降解和失活。
避免多次冻融:尽量避免频繁冻融,因为多次的冻融循环可能会降低抗体的稳定性和活性。
进行验证:在使用之前,进行一次验证实验来检查抗体的功能和效力。可以使用已知的阳性对照样本或细胞提取物进行Western blot,以确保抗体仍然能够识别目标蛋白。
咨询供应商:如果你对抗体的稳定性和适用条件有任何疑问,建议咨询抗体供应商。他们通常能提供更具体的建议和技术支持。
总之,虽然不慎将WB抗体放入-20°C可能会对其稳定性造成一定影响,但如果采取适当的措施,如快速转移到更低的温度并进行验证实验,抗体可能仍然可用。
https://dgsupera100.com/
chenzhen2016
(2023-8-08 15:18:03)
抱歉听到你的困扰。抗体的保存非常重要,不恰当的保存条件可能会影响抗体的活性和效果。关于你的情况,以下是一些可能的建议:
1. 冰箱温度: 一般来说,抗体应该保存在-20°C或更低的温度,以防止其变性和降解。将抗体放入-20°C冰箱通常是可以接受的,但在-20°C以下存储抗体可能会更好。
2. 温度稳定性: 不同的抗体和供应商可能具有不同的温度稳定性。某些抗体可能对-20°C的储存非常敏感,而另一些抗体可能能够在短期内忍受。
3. 抗体类型: IgG类抗体通常较为稳定,而一些特殊类型的抗体可能对温度更敏感。如果你的抗体是IgG类,那么在-20°C短时间内可能不会引起太大问题。
4. 保存时间: 抗体在-20°C下保存的时间也会影响其稳定性。短时间内(几天至几周),抗体可能仍然可用,但长时间存储在-20°C下可能会影响其性能。
为了确保抗体的活性和效果,你可以尝试以下步骤:
* 尽快将抗体从-20°C冰箱中取出,并迅速转移到更低的温度,如-80°C。
* 如果你有使用前的小量试验,可以先进行一次实验来测试抗体的活性。
* 与供应商或生产商联系,询问该抗体在-20°C下的稳定性和恢复性。
无论如何,最好的建议是在确保抗体的效果之前,与实验室同事、导师或供应商交流,以获取更准确的指导。在做实验前,确保抗体是否适用非常重要,以避免浪费时间和资源。
chenzhen2016
(2023-8-18 16:20:51)
抗体的保存条件是非常重要的,存储温度对抗体的稳定性和活性都有很大影响。一般来说,抗体应该存放在推荐的温度下,以确保其最佳性能。放入-20度的情况可能会影响抗体的活性,但并不是一定会使抗体失效。
以下是一些建议,供你参考:
1. 快速冻存: 如果抗体在放入-20度之前没有暴露在室温下太长时间,可以考虑快速将抗体移至-20度,并确保尽量避免反复冻融过程。
2. 小试验: 如果你非常关心抗体是否受到影响,可以进行小规模的Western blot测试,以检测抗体的活性和特异性。这可以帮助你判断抗体是否还能够用于实验。
3. 防止再次冻融: 尽量避免多次冻融,因为反复冻融可能会对抗体的稳定性产生不利影响。
4. 联系供应商: 如果你购买的是商业抗体,可以尝试联系供应商,了解他们的建议和经验。他们可能会提供更具体的信息。
5. 备用抗体: 如果抗体的活性已经受到影响,你可以考虑使用备用的抗体来进行实验,以确保实验结果的可靠性。
需要注意的是,不同的抗体有不同的稳定性,因此最好遵循制造商的存储和使用建议。如果你的抗体存放在-20度后表现出异常,可能需要重新购买新的抗体。
最终,如果你的抗体在测试中表现不佳,最好再次购买新的抗体以确保实验的准确性和可靠性。
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【求助】抗体保存
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yjf1026 (2014-5-29 17:30:49)
你用时从冰箱里拿出来,看一下万一有沉淀或者浑浊物,等恢复到室温如果没有沉淀或者浑浊物,那就可以放心使用
owanaka (2014-5-29 17:31:09)
可以的,我以前做WB,和EMSA的时候犯过同样的错误,不过解冻后做试验仍然有结果!!!
lgm (2014-5-29 17:31:27)
莓菓333 (2014-5-29 17:31:50)
谢谢大家,早晨发现时,我都快疯了,都是那天太忙,我们的冰箱,旧的是上边-20,下边4,新的正好相反,谢谢各位,另外今天有发现一个问题,请教:一般1抗,二抗用什么稀释,我买的中山分装的二抗,说明是1:5000-1:10000,做ELASA/WB,我直接把稀释的1:1000的二抗和DAB反应,无色,最好,直接滴加二抗原液,才出现很微弱的棕色,请问,是不是这个二抗效价有问题?
mod=8048 (2014-5-29 17:32:19)
抗体用封闭液稀释即可,如BSA等,如你直接加HRP二抗 原液 ,如能确保DAB 没有问题,那么只能说明你的二抗有问题
yueban-1147 (2014-5-29 17:34:43)
抗体用封闭液稀释即可,如BSA等,如你直接加HRP二抗 原液 ,如能确保DAB 没有问题,那么只能说明你的二抗有问题
gogo (2014-5-29 17:35:03)
二抗用封闭液稀释既可,抗体操作特别要注意温度要求,千万不要太高!
woshiduiyan (2014-5-29 17:35:21)
用5%的脱脂牛奶就可以了
莓菓333 (2014-5-29 17:35:39)
谢谢各位,再弱弱的问,抗体用封闭液稀释,那么配置这个封闭液有什么特别的要求?比如水质,无菌?
hold住 (2014-5-29 17:35:55)
如果做WB,并不严格要求无菌,水质一般用去离子水,封闭液用脱脂牛奶或BSA,注意现用现配的好
guokezi (2022-7-21 15:53:29)
chenzhen2016 (2023-7-08 16:38:12)
快速恢复:尽快将抗体从-20°C转移到-80°C或更低的温度,以减少潜在的蛋白质降解和失活。
避免多次冻融:尽量避免频繁冻融,因为多次的冻融循环可能会降低抗体的稳定性和活性。
进行验证:在使用之前,进行一次验证实验来检查抗体的功能和效力。可以使用已知的阳性对照样本或细胞提取物进行Western blot,以确保抗体仍然能够识别目标蛋白。
咨询供应商:如果你对抗体的稳定性和适用条件有任何疑问,建议咨询抗体供应商。他们通常能提供更具体的建议和技术支持。
总之,虽然不慎将WB抗体放入-20°C可能会对其稳定性造成一定影响,但如果采取适当的措施,如快速转移到更低的温度并进行验证实验,抗体可能仍然可用。https://dgsupera100.com/
chenzhen2016 (2023-8-08 15:18:03)
1. 冰箱温度: 一般来说,抗体应该保存在-20°C或更低的温度,以防止其变性和降解。将抗体放入-20°C冰箱通常是可以接受的,但在-20°C以下存储抗体可能会更好。
2. 温度稳定性: 不同的抗体和供应商可能具有不同的温度稳定性。某些抗体可能对-20°C的储存非常敏感,而另一些抗体可能能够在短期内忍受。
3. 抗体类型: IgG类抗体通常较为稳定,而一些特殊类型的抗体可能对温度更敏感。如果你的抗体是IgG类,那么在-20°C短时间内可能不会引起太大问题。
4. 保存时间: 抗体在-20°C下保存的时间也会影响其稳定性。短时间内(几天至几周),抗体可能仍然可用,但长时间存储在-20°C下可能会影响其性能。
为了确保抗体的活性和效果,你可以尝试以下步骤:
* 尽快将抗体从-20°C冰箱中取出,并迅速转移到更低的温度,如-80°C。
* 如果你有使用前的小量试验,可以先进行一次实验来测试抗体的活性。
* 与供应商或生产商联系,询问该抗体在-20°C下的稳定性和恢复性。
无论如何,最好的建议是在确保抗体的效果之前,与实验室同事、导师或供应商交流,以获取更准确的指导。在做实验前,确保抗体是否适用非常重要,以避免浪费时间和资源。
chenzhen2016 (2023-8-18 16:20:51)
以下是一些建议,供你参考:
1. 快速冻存: 如果抗体在放入-20度之前没有暴露在室温下太长时间,可以考虑快速将抗体移至-20度,并确保尽量避免反复冻融过程。
2. 小试验: 如果你非常关心抗体是否受到影响,可以进行小规模的Western blot测试,以检测抗体的活性和特异性。这可以帮助你判断抗体是否还能够用于实验。
3. 防止再次冻融: 尽量避免多次冻融,因为反复冻融可能会对抗体的稳定性产生不利影响。
4. 联系供应商: 如果你购买的是商业抗体,可以尝试联系供应商,了解他们的建议和经验。他们可能会提供更具体的信息。
5. 备用抗体: 如果抗体的活性已经受到影响,你可以考虑使用备用的抗体来进行实验,以确保实验结果的可靠性。
需要注意的是,不同的抗体有不同的稳定性,因此最好遵循制造商的存储和使用建议。如果你的抗体存放在-20度后表现出异常,可能需要重新购买新的抗体。
最终,如果你的抗体在测试中表现不佳,最好再次购买新的抗体以确保实验的准确性和可靠性。
【求助】抗体保存