【求助】抗体保存

最新回复

• yjf1026 (2014-5-29 17:30:49)

  应该可以用的.
  你用时从冰箱里拿出来,看一下万一有沉淀或者浑浊物,等恢复到室温如果没有沉淀或者浑浊物,那就可以放心使用

• owanaka (2014-5-29 17:31:09)

  
  可以的,我以前做WB,和EMSA的时候犯过同样的错误,不过解冻后做试验仍然有结果!!!

• lgm (2014-5-29 17:31:27)

  santa 的抗体没有冷冻保护剂，因此建议放在4度，拿出来时记得放在4度缓慢升温，避免反复冻融，不过短时间内放在负20度对抗体的效价影响也不是很大

• 莓菓333 (2014-5-29 17:31:50)

  
  谢谢大家,早晨发现时,我都快疯了,都是那天太忙,我们的冰箱,旧的是上边-20,下边4,新的正好相反,谢谢各位,另外今天有发现一个问题,请教:一般1抗,二抗用什么稀释,我买的中山分装的二抗,说明是1:5000-1:10000,做ELASA/WB,我直接把稀释的1:1000的二抗和DAB反应,无色,最好,直接滴加二抗原液,才出现很微弱的棕色,请问,是不是这个二抗效价有问题?

• mod=8048 (2014-5-29 17:32:19)

  
  抗体用封闭液稀释即可，如BSA等，如你直接加HRP二抗 原液 ，如能确保DAB 没有问题，那么只能说明你的二抗有问题

• yueban-1147 (2014-5-29 17:34:43)

  
  抗体用封闭液稀释即可，如BSA等，如你直接加HRP二抗 原液 ，如能确保DAB 没有问题，那么只能说明你的二抗有问题

• gogo (2014-5-29 17:35:03)

  
  二抗用封闭液稀释既可，抗体操作特别要注意温度要求，千万不要太高！

• woshiduiyan (2014-5-29 17:35:21)

  
  用5%的脱脂牛奶就可以了

• 莓菓333 (2014-5-29 17:35:39)

  
  谢谢各位,再弱弱的问,抗体用封闭液稀释,那么配置这个封闭液有什么特别的要求?比如水质,无菌?

• hold住 (2014-5-29 17:35:55)

  
  如果做WB，并不严格要求无菌，水质一般用去离子水，封闭液用脱脂牛奶或BSA，注意现用现配的好

• guokezi (2022-7-21 15:53:29)

  如果有沉淀的话怎么办，我碰过过，做出来测值偏低，有时候也会偏高，它的保存液里面只有PBS、叠氮钠。所以这个沉淀是抗体吗

• chenzhen2016 (2023-7-08 16:38:12)

  一般情况下，WB抗体在-20°C的冷冻条件下是可以保持稳定的。但是，如果WB抗体被放入-20°C的冷冻库存中，需要注意以下几点：
  
  快速恢复：尽快将抗体从-20°C转移到-80°C或更低的温度，以减少潜在的蛋白质降解和失活。
  
  避免多次冻融：尽量避免频繁冻融，因为多次的冻融循环可能会降低抗体的稳定性和活性。
  
  进行验证：在使用之前，进行一次验证实验来检查抗体的功能和效力。可以使用已知的阳性对照样本或细胞提取物进行Western blot，以确保抗体仍然能够识别目标蛋白。
  
  咨询供应商：如果你对抗体的稳定性和适用条件有任何疑问，建议咨询抗体供应商。他们通常能提供更具体的建议和技术支持。
  
  总之，虽然不慎将WB抗体放入-20°C可能会对其稳定性造成一定影响，但如果采取适当的措施，如快速转移到更低的温度并进行验证实验，抗体可能仍然可用。https://dgsupera100.com/

• chenzhen2016 (2023-8-08 15:18:03)

  抱歉听到你的困扰。抗体的保存非常重要，不恰当的保存条件可能会影响抗体的活性和效果。关于你的情况，以下是一些可能的建议：
  
  1. 冰箱温度： 一般来说，抗体应该保存在-20°C或更低的温度，以防止其变性和降解。将抗体放入-20°C冰箱通常是可以接受的，但在-20°C以下存储抗体可能会更好。
  
  2. 温度稳定性： 不同的抗体和供应商可能具有不同的温度稳定性。某些抗体可能对-20°C的储存非常敏感，而另一些抗体可能能够在短期内忍受。
  
  3. 抗体类型： IgG类抗体通常较为稳定，而一些特殊类型的抗体可能对温度更敏感。如果你的抗体是IgG类，那么在-20°C短时间内可能不会引起太大问题。
  
  4. 保存时间： 抗体在-20°C下保存的时间也会影响其稳定性。短时间内（几天至几周），抗体可能仍然可用，但长时间存储在-20°C下可能会影响其性能。
  
  为了确保抗体的活性和效果，你可以尝试以下步骤：
  
  * 尽快将抗体从-20°C冰箱中取出，并迅速转移到更低的温度，如-80°C。
  * 如果你有使用前的小量试验，可以先进行一次实验来测试抗体的活性。
  * 与供应商或生产商联系，询问该抗体在-20°C下的稳定性和恢复性。
  
  无论如何，最好的建议是在确保抗体的效果之前，与实验室同事、导师或供应商交流，以获取更准确的指导。在做实验前，确保抗体是否适用非常重要，以避免浪费时间和资源。

• chenzhen2016 (2023-8-18 16:20:51)

  抗体的保存条件是非常重要的，存储温度对抗体的稳定性和活性都有很大影响。一般来说，抗体应该存放在推荐的温度下，以确保其最佳性能。放入－20度的情况可能会影响抗体的活性，但并不是一定会使抗体失效。
  
  以下是一些建议，供你参考：
  
  1. 快速冻存： 如果抗体在放入－20度之前没有暴露在室温下太长时间，可以考虑快速将抗体移至－20度，并确保尽量避免反复冻融过程。
  
  2. 小试验： 如果你非常关心抗体是否受到影响，可以进行小规模的Western blot测试，以检测抗体的活性和特异性。这可以帮助你判断抗体是否还能够用于实验。
  
  3. 防止再次冻融： 尽量避免多次冻融，因为反复冻融可能会对抗体的稳定性产生不利影响。
  
  4. 联系供应商： 如果你购买的是商业抗体，可以尝试联系供应商，了解他们的建议和经验。他们可能会提供更具体的信息。
  
  5. 备用抗体： 如果抗体的活性已经受到影响，你可以考虑使用备用的抗体来进行实验，以确保实验结果的可靠性。
  
  需要注意的是，不同的抗体有不同的稳定性，因此最好遵循制造商的存储和使用建议。如果你的抗体存放在－20度后表现出异常，可能需要重新购买新的抗体。
  
  最终，如果你的抗体在测试中表现不佳，最好再次购买新的抗体以确保实验的准确性和可靠性。