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【求助】有没有人用过旋转蒸发仪干燥蛋白的?
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发表于: 2014-6-19 10:12 作者: lixi559 来源: 分析测试百科网
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【求助】有没有人用过旋转蒸发仪干燥蛋白的?
请问旋转蒸发仪干燥对蛋白活性有没有影响?
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【求助】有没有人用过旋转蒸发仪干燥蛋白的?
我也来说两句
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最新回复
remenb
(2014-6-19 10:12:40)
要看蛋白而定了,旋转蒸发过程中加热可能对一些酶的活性有影响。而且为了蒸发过程中不起泡要加入正丁醇,可能会引入杂质对以后的分离有影响。我曾经遇到过浓缩到一定体积后蛋白不溶的情况,可能是中间出现变性了。这还是很麻烦的,因为样品很有限,处理过程中的一些不利因素导致样品损失还是很可惜的。如果有条件的话建议冻干。
NBA
(2014-6-19 10:13:09)
如果您要的蛋白很容易纯化,而且有文献(要最近的而且比较有影响力的)报道说可以这样做,我觉得可以试试(只是试试,效果如何还是要看实验结果)。
如remenb战友所说,如果有条件最好冻干。免得文章送出去别人提问题不太好回答。如果碰到一个较真的referee,坚持说你这样做蛋白变性损失很大,跟natural的蛋白差别太大,那可是整个试验体系的问题,麻烦得很。
供您参考。
lixi559
(2014-6-19 10:17:03)
谢谢两位!
旋转蒸发仪的温度可控吗,太高肯定受不了啊
我的蛋白太小5kD,脱盐后稀释了,浓度很低,浓缩挺麻烦,有没有什么经济实用的法子啊?
orangecake
(2014-6-19 10:18:13)
最好是用冷冻干燥。旋转蒸发其实主要利用水浴和负压浓缩液体的,温度可控。
莲花白
(2014-6-19 10:21:29)
对,用冷冻干燥的方法很好!
zsxan1990
(2014-6-19 10:21:46)
氮气吹干温度也不高
lixi559
(2014-6-19 10:32:21)
"氮气吹干"怎么做,没做过,需要什么设备
avi317
(2014-6-19 10:32:56)
要看蛋白而定了,旋转蒸发过程中加热可能对一些酶的活性有影响。而且为了蒸发过程中不起泡要加入正丁醇,可能会引入杂质对以后的分离有影响。我曾经遇到过浓缩到一定体积后蛋白不溶的情况,可能是中间出现变性了。这还是很麻烦的,因为样品很有限,处理过程中的一些不利因素导致样品损失还是很可惜的。如果有条件的话建议冻干。
段 先 生
环球(香港)科技有限公司北京办事处
电话:010-68012233转302
手机:13146153609
传真:010-68017314
地址:北京西城区阜成门外大街2号万通新世界广场A2111室
cuturl('Http://www.universalhkco.com.cn')
fsdd817
(2014-6-19 10:33:20)
建议用温敏凝胶一试
小糖块
(2014-6-19 10:33:42)
您好:我想问一下什么是温敏凝胶?它可以使蛋白浓缩干燥吗?
H2O
(2014-6-19 10:35:06)
还可以用聚乙二醇吸水,并且试剂可以回收,先准备好透析袋即可。
dog002
(2014-6-19 10:35:27)
用冻干可以,但是如果太大量就不好做了
建议先超滤浓缩,到了一定的量后在进行冻干.
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【求助】有没有人用过旋转蒸发仪干燥蛋白的?
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remenb (2014-6-19 10:12:40)
要看蛋白而定了,旋转蒸发过程中加热可能对一些酶的活性有影响。而且为了蒸发过程中不起泡要加入正丁醇,可能会引入杂质对以后的分离有影响。我曾经遇到过浓缩到一定体积后蛋白不溶的情况,可能是中间出现变性了。这还是很麻烦的,因为样品很有限,处理过程中的一些不利因素导致样品损失还是很可惜的。如果有条件的话建议冻干。
NBA (2014-6-19 10:13:09)
如remenb战友所说,如果有条件最好冻干。免得文章送出去别人提问题不太好回答。如果碰到一个较真的referee,坚持说你这样做蛋白变性损失很大,跟natural的蛋白差别太大,那可是整个试验体系的问题,麻烦得很。
供您参考。
lixi559 (2014-6-19 10:17:03)
谢谢两位!
旋转蒸发仪的温度可控吗,太高肯定受不了啊
我的蛋白太小5kD,脱盐后稀释了,浓度很低,浓缩挺麻烦,有没有什么经济实用的法子啊?
orangecake (2014-6-19 10:18:13)
莲花白 (2014-6-19 10:21:29)
对,用冷冻干燥的方法很好!
zsxan1990 (2014-6-19 10:21:46)
氮气吹干温度也不高
lixi559 (2014-6-19 10:32:21)
"氮气吹干"怎么做,没做过,需要什么设备
avi317 (2014-6-19 10:32:56)
要看蛋白而定了,旋转蒸发过程中加热可能对一些酶的活性有影响。而且为了蒸发过程中不起泡要加入正丁醇,可能会引入杂质对以后的分离有影响。我曾经遇到过浓缩到一定体积后蛋白不溶的情况,可能是中间出现变性了。这还是很麻烦的,因为样品很有限,处理过程中的一些不利因素导致样品损失还是很可惜的。如果有条件的话建议冻干。
段 先 生
环球(香港)科技有限公司北京办事处
电话:010-68012233转302
手机:13146153609
传真:010-68017314
地址:北京西城区阜成门外大街2号万通新世界广场A2111室
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fsdd817 (2014-6-19 10:33:20)
建议用温敏凝胶一试
小糖块 (2014-6-19 10:33:42)
H2O (2014-6-19 10:35:06)
还可以用聚乙二醇吸水,并且试剂可以回收,先准备好透析袋即可。
dog002 (2014-6-19 10:35:27)
用冻干可以,但是如果太大量就不好做了
建议先超滤浓缩,到了一定的量后在进行冻干.
【求助】有没有人用过旋转蒸发仪干燥蛋白的?