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【求助】这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗
这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗!??【求助】这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗
小弟做的实验主要是测酶活和抑制剂对酶的抑制效果,流动相:0.8%乙腈,20mM三乙胺,用醋酸调PH到6.0,波长259nm。
第一天测的样品很正常,几个峰都能分开,产物出峰时间在6.3min左右。
但是第二天,在酶反应体系中加入了极少量的DMSO后,就在3.3min左右出现了一个非常大的峰,很怪异!我测过,DMSO在259nm波长处基本上是无吸收的,我重复了很多次,这个峰一直都出现。
这个突然出现的大峰是溶剂峰吗,为什么会这么的大,这个峰的出现导致我的检测的结果很不准确,产物出的峰都成山丘一样凸起来的了,根本就不是尖的,大伙帮我看看是怎么回事吧。
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最新回复
灵魂 (2016-4-27 11:31:29)
rrra6 (2016-4-27 11:31:46)
DMSO有时候基线不太好,但不会出现这样的溶剂峰。俺270nm液相DMSO无问
jishiben (2016-4-27 11:32:09)
DMSO对保留时间有影响,3.3m可能为某主峰。。
哈密瓜 (2016-4-27 11:32:35)
wawa11 (2016-4-27 11:33:02)
女儿情 (2016-4-27 11:33:23)
可能是产物的一个变化体
QQ爱 (2016-4-27 11:34:07)
C18的柱子流动相里面的水的含量最低能是多少啊?
我这个反应体系确实是图一中峰1、2是酶反应底物,1+2---->峰3,但是反应10分钟后,我用沸水煮了10分钟,使酶失活终止反应了,所以按道理,这个反应不能继续进行了。
关于图2,为什么加DMSO,是因为我要加入酶抑制剂,看抑制剂的抑制效果,而那些小分子抑制剂都是溶解在DMSO里面的,加入DMSO或者抑制剂后,这个大峰就出现了。
这个问题我一直不知道是为什么,因为我换柱子后,这个大峰就消失了,我只能认为是柱子的原因,因为我用的是伊力特C18的柱子,这个柱子的流动相里面有机相含量最好是不能少于10%的,而我的流动相里面的有机相几乎为0,因为加入有机相后几个峰会连在一起而分不开,所以只能减少有机相的含量,现在用的是安捷伦TC-C18(2)的柱子,流动相里面加入了5%的甲醇,虽然能做出来,但是重复性不是很好,我这个星期实验了再和大家交流下啊。
p1900 (2016-4-27 11:34:32)
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