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标题:[未解决]包涵体蛋白的纯化策略

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发表于 2018-3-12 09:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

包涵体蛋白的纯化策略

楼主最近计划用大肠杆菌表达体系表达包涵体蛋白，用于实验动物免疫来获取相应的多克隆抗体。听闻包涵体蛋白的复性是一个策略与经验并存的过程，也是一个及其复杂的事情。故在此想请各位高手能不能提供一些比较好的复性方法和经验。之前做过两个变性蛋白的复性，复性效果不好的话用于实验动物免疫，产生的抗体含量很低！谢谢各位！
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发表于 2018-3-27 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
亲，变性复性针对蛋白质的活性影响很大，想问下你试过多久大肠表达，可溶性概率几乎没有还是其他的，建议更换载体尝试进行可溶性表达，pSMART载体为卡纳抗性，含有SUMO标签及6xHis标签，SUMO标签有利于增强蛋白可溶性表达，我们用这个用多。我是做抗体的公司，免疫原我们都是用的可溶性的蛋白的，除非完全只有包涵体表达的情况，一般我们都会多尝试，建议你试试。
我的QQ769782615，欢迎沟通交流
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发表于 2021-12-8 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白表达都在包涵体

我的蛋白如图所示，1是未诱导，2是诱导后，3是超声后上清，4是沉淀
我可以直接用沉淀去上柱子纯化么


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发表于 2021-12-8 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白表达都在包涵体

我的蛋白如图所示，1是未诱导，2是诱导后，3是超声后上清，4是沉淀
我可以直接用沉淀去上柱子纯化么


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发表于 2022-6-17 12:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
亲，变性复性针对蛋白质的活性影响很大，想问下你试过多久大肠表达，可溶性概率几乎没有还是其他的，建议更换载体尝试进行可溶性表达，pSMART载体为卡纳抗性，含有SUMO标签及6xHis标签，SUMO标签有利于增强蛋白可溶性表达，我们用这个用多
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