热休克蛋白90（Hsp90）是一种广泛存在于细胞内，参与客户蛋白的活化、折叠等过程，发挥分子伴侣的作用的蛋白。其表达量会随着肿瘤发展阶段而改变，在肿瘤细胞内其表达较正常细胞高2~10倍，因此进行抑制Hsp90活性的化合物筛选研究也备受医药研究者的关注。

Hsp90的效应蛋白包括Raf-1、突变型BRaf、IGF-IR、Akt、Her2、C-Met、C-Kit、突变型EGFR等。在肿瘤的发展变化过程中，这些效应蛋白均过度表达，因此测定Hsp90的效应蛋白可以预防并监测癌症的发生。Hsp90的主要分子伴侣包括Hsp70、Hip、Hop、CDC37/P50等，其中Hsp70最为关键。Hsp90与Hsp70通过第三方伴侣蛋白Hop连接成为分子伴侣复合物，这个伴侣复合物在细胞增殖过程中扮演着十分重要的角色。由于应激条件下的Hsp90在转化或选择效应蛋白上更具有优势，因此它与小分子抑制剂的亲和力比正常细胞的Hsp90与小分子抑制剂的亲和力更高。

Hsp90已经成为一类重要的抗肿瘤生物学靶点。进行抑制Hsp90活性的化合物筛选研究对于以Hsp90为靶点的抗肿瘤药物研发至关重要。化合物活性筛选属于药物化学研究，美迪西合成的化合物活性测定服务。

1、抑制Hsp90活性的化合物筛选及抗肿瘤作用研究

Hsp90抑制剂主要分为两大类。第一类为天然抑制剂，一般为从植物中提取的抗生素类化合物，主要包括格尔德霉素类和根赤壳素类化合物。第二类为人工设计合成的抑制剂。由于天然抑制剂的局限性，目前科学家正在努力用一些已经拥有的和一些新的结构骨架来尝试人工合成新的Hsp90抑制剂。有研究者通过与化学家合作，得到了一批基于片段组合设计的新型HSP90抑制剂，分子水平的荧光偏振技术初筛发现FS81具有较好的活性，随后他们对FS81的抗肿瘤活性进行了系统的体内外评价[1]。

对化合物FS81的抗肿瘤广谱性研究发现，FS81对多种组织来源的肿瘤细胞株均具有显著的增殖抑制作用，IC50在11-931nM之间，与阳性药NVP-AUY922相当。进一步信号通路研究发现，FS81能剂量依赖性的降解细胞内包括c-Met、EGFR、ALK、HER2等在内的诸多客户蛋白，并伴随着下游主要信号分子AKT、ERK磷酸化水平的降低和Hsp70诱导反馈性上调等。但体内结果表明，FS81对人神经胶质瘤U87-MG裸小鼠移植瘤的生长并没有明显的抑制作用，初步的药代动力学研究提示可能是由于FS81半衰期较短所导致。尽管FS81的体内抗肿瘤活性不甚理想，通过该研究研究者为此类化合物进行进一步的结构改造并开发更具前景的Hsp90抑制剂提供了重要的实验依据及理论参考。

2、抑制Hsp90活性的Fs系列的化合物筛选研究

也有研究者初步评价经计算机模拟筛选的Fs系列化合物对A549细胞的增殖抑制作用与对热休克蛋白90活性的抑制[2]。Fs化合物是基于片段组合设计的新型Hsp90抑制剂，研究者首先采用SRB(磺基罗丹明B)法观察26个化合物对A549肿瘤细胞增殖抑制活性，再进一步应用Western Blot方法对此类化合物在蛋白水平上对热休克蛋白90活性的抑制进行评价。以热休克蛋白70的表达增加作为热休克蛋白90活性是否被抑制的参考指标。

结果在Fs系列化合物中Fs-1、Fs-8、Fs-24对A549细胞增殖有明显抑制，且能明显上调Hsp70蛋白的表达，但同时Hsp90蛋白的表达量并不受影响。其余化合物在两种方法中显示均无明显抑制作用。因此在经计算机模拟筛选出的26种Fs系列化合物中Fs-1、Fs-8、Fs-24可抑制A549细胞的增殖，可能是通过对Hsp90活性的抑制而发挥作用，经筛选其余Fs系列化合物抑制A549细胞增殖与抑制Hsp90活性作用均不显著。Fs-1、Fs-8、Fs-24类化合物作用的初步探索将为研制Hsp90靶向抑制剂类药物开辟新途径。

随着肿瘤靶向治疗研究的进展，Hsp90抑制剂的开发是抗肿瘤药物研究的靶点和热点之一，因此建立进行抑制Hsp90活性的化合物筛选模型是Hsp90抑制剂开发的重要环节。研究天然来源的Hsp90抑制剂的同时，同时开发新型小分子抑制剂，通过基于结构的药物设计、基于片段的药物设计、高通量筛选和虚拟筛选等方法，发现若干结构新颖的Hsp90抑制剂在抗肿瘤药物研发方面具有很好的发展潜力。

[1]Hsp90抑制剂的筛选及活性化合物抗肿瘤作用研究[J].

[2]热休克蛋白90抑制剂的活性初步评价[J].