肾癌动物模型建立的细胞系之 A498细胞系

肾癌动物模型是研究肾癌疾病机制和探索肾癌治疗方法的重要模型,利用肾癌细胞系建立小鼠肾癌模型,并检测肾癌细胞对分子靶向药物的敏感性,能够为相关临床诊疗提供理论和实验依据。在医学研究上的,常见的肾癌细胞系有ACHN OS-RC-2 786-O A498,今天我们来简单了解一下A498人肾癌细胞系。



A498
细胞系由Aaronson S建立,源自一位52岁患有肾癌的女性病人,为人类探知生物学方面做出了很多贡献。因为老鼠体内的肿瘤可以反应人类基因和肿瘤的分子和细胞特性,因此,癌症研究和新疗法的检测也依赖于精确设计的老鼠模型。利用小鼠肾癌模型有助于更深入地了解肾癌背后的生物学机制,并可以利用这些新模型寻找新的治疗靶点,尽快在临床前模型中进行确认并寻找可能的新型疗法。探讨化合物对肾癌细胞的作用及发挥抑制作用的分子机制,可以为临床抗肾癌药物的研究提供有价值的新靶点。

如有研究者利用体外实验研究某化合物对肾癌A498细胞的杀伤作用,研究者将不同浓度的化合物作用于肾癌A498细胞48h,通过CCK8检测各组细胞存活率,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,Western blot法检测各组细胞Baxcleaved caspase-3蛋白表达量的变化。通过该实验探索化合物对肾癌A498细胞的作用,为探索新的抗肾癌药物提供了研究基础。

CCK-8法主要用于细胞毒性及细胞增殖率的检测,该试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析,常用于肿瘤细胞增殖研究。美迪西是一家CRO公司,提供细胞迁移实验服务,其在分子生物学、细胞生物学、体外生物学和结构生物学领域有丰富广泛的经验。从最初的cDNA文库构建到药物设计,通过蛋白质纯化,结构测定和分析测定,提供一套完整的生物学服务。

如在TRPC1对人肾癌细胞A498增殖和迁移的影响的一文中,有研究者探讨了瞬时受体电位C1(TRPC1)对人肾癌细胞A498细胞增殖和迁移的影响[1]TRPC1是一个被克隆的哺乳动物TRP超家族和TRPC家族成员,其参与了细胞迁移、细胞增殖和肿瘤转移等细胞生理生化过程。

研究者利用荧光定量PCR检测人肾癌细胞A498786-OGRC-1TRPC1的表达水平。设计并合成靶向TRPC1的特异性sh RNA,通过脂质体转染法转染TRPC1表达最高的人肾癌细胞A498以构建稳定低表达TRPC1细胞株,通过免疫印迹法和荧光定量PCR来验证sh RNA的干扰效率;通过MTT比色法检测干扰后细胞的增殖能力;通过Transwell小室测细胞迁移情况;免疫印迹法检测PI3KAKT的表达水平。该研究发现采用RNA干扰技术能够有效沉默A498细胞的TRPC1基因,并致使其细胞增殖能力下降以及细胞迁移能力减弱,其中可能的机制为通过调节细胞因子PI3K来调控人肾癌细胞的增殖和迁移。提示TRPC1在肾癌的发生发展中起着较为重要作用,TRPC1可能成为治疗肾癌的新靶点。

总之选择合适的肾癌细胞系,并探讨化合物对肾癌细胞系生长的抑制作用,为肾癌发生机制和基因治疗研究提供了理论依据。

[1] TRPC1对人肾癌细胞A498增殖和迁移的影响[J].