[求助]THP-1悬浮细胞培养

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标题:[求助]THP-1悬浮细胞培养

wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

实验才进行了几个月，发现本来养好了的细胞又开始不好了，我养的是THP-1悬浮细胞，以前是隔三天就吸出3分之1的液体，换上同样量的培养基（培养基和血清已混合），三天就可以传代了，可是现在5天都不敢传代，细胞根本就不怎么长，培养基颜色也没有变黄，有的人说悬浮细胞要定期离心，我之前也试过，每次离心之后，细胞就会变形，长得非常难看，所以我一直就不离心，前几天因为实验的要求，我想给细胞更换新的培养基，于是就决定再试着离心一次，可是自从离心之后细胞就开始不好，里面的碎片也有不少，THP-1悬浮细胞究竟有没有必要离心传代？如果传代是否需要吹打均匀？因为我传代时不怎么吹打的，但是现在看细胞就有成团的现象。不知道有没有哪位大虾能够指点迷径阿？

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果细胞活性好，2～3天肯定可以传代。细胞培养基一旦偏酸，要及时传代，否则很快贴壁，就很难再恢复原先的活性了。

彼岸花opp[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个细胞离心可以吧,转速不要太大!应该吹散吧!是不是培养液太久了!

vvmmoy[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

同意二楼群友的说法，THP-1适宜在偏碱性环境（PH7.5左右)生长，对数生长期基本上24小时翻倍。不要等变黄，培养液偏酸就不好了。实在碎片多了还是可以离心的，1000转3分钟就可以，不多的话，可以在培养箱中把培养瓶站立放置半小时，让细胞沉淀在底部，吸去上层液体，更换培养液。贴壁不多可以轻轻吹打。多的话就更换培养瓶，另外注意，培养瓶要用塑料的，千万别用玻璃瓶，不然贴壁很厉害

wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢大家，to l2001iu:你的THP-1怎么不是均匀分布的，你照片里好像是一团o哦。
不是塑料瓶更容易使细胞贴壁吗？原来THP-1适宜在碱性环境中生长阿，我一直以为偏酸性环境对细胞生长好一些。明天给它换液，采用你们提供的方法，还是要离心，今天我去看了一下，真的很难看哦，好多碴碴。

hot_hot_hot[使用道具]
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发表于 2012-2-10 17:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

THP-1属单核细胞系，有单核细胞粘附玻璃的特性。

wu11998866[使用道具]
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