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标题: 【经验】HPLC分析样品的原则 [打印本页]

作者: kflsjjfdl 时间: 2010-3-16 13:46 标题: 【经验】HPLC分析样品的原则

　根据我多年的分析经验来谈一下我个人的看法：

　　分析一个样品，不是一拿来就试着用各种流动相来分离，而是首先要分析样品着手。是否为高分子化合物、粘度大、具有生物活性的生物分子、有些或全部的样品成分是否可电离(根据这样条件可选择色谱柱、流动相、柱温、流速、离子对试剂、是否需要预处理等等)......

　　具体分析：首先应了解样品的溶解性质，判断样品分子量的大小以及可能存在的分子结构及分析特性，最后再选择HPLC的分离模式，以完成对样品的分析。

　　样品的溶解度，由样品在有机溶剂中溶解度的大小，初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物，若样品溶于非极性溶剂，表明样品为非极性化合物，通常可以选吸附色谱法或正相分配色谱法、正相健合色谱法进行分析。苦样品溶于极性溶剂或相混溶的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常选用反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。若样品溶于水相，可首先检查水溶液的pH值，若呈中性为非离子型组分，常可用反相(或正相)键合相色谱法进行分析。若pH 呈弱酸性，可采用抑制样品电离的方法，在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2～3，再用反相键合相色谱法进行分析。若pH呈弱碱性，则可向流动相中加入阳离子型反离子，再用离子对色谱法进行分析。若pH呈强酸性或强碱性，则可用离子色谱法进行分析。由于除去固定相中的离子对试剂较慢，当改变流动相时，有时需要长时间的平衡;再由于离子对试剂纯度问题，使离子对中的基线波动问题和干扰问题现象比较常见。

　　优化条件在于最终色谱图中能产生出最嗌分开的谱峰。了解化合物的化学结构，知道是否存在酸或碱，当流动相的pH值=混合物的平均pKa值或接近时,可能会使分离较好。先优化K;随着容量因子的增加，谱峰会展宽，峰形变矮。(当所有谱峰符合1<20的范围时，其流动相已接近最佳了;再Α(≥1.05);最后优化N，不同微粒的柱子均有一个最佳流速，流速再高会降低N值;如果降低流速，则会增加工作时间，但分离度会更好。当流动相粘度增加时，N值也将降低;因此尽可能使用低粘度的溶剂。用最小RS法，另加常识(数一下峰!)，在大多数情况下将是最佳方案。< p>
　　至于谱峰拖尾影响因素是很多的，可解决的办法有：

　　在缓冲不好或离子强度过低的分离中，也会出现保留值重现性差和峰拖尾。增加缓冲浓度(与样品大小相匹配)能大大改善此情况。

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作者: 饮食男女 时间: 2010-3-16 13:50

非常感谢，学了不少。

作者: amelican_beauty 时间: 2010-3-16 13:51

不错的经验，楼上真是高人。。

作者: sacred 时间: 2010-3-16 13:54

感谢共享，学习之

作者: 健康千万家 时间: 2010-3-16 13:57

谢谢，看来楼主经验丰富啊，建议多多分享！

作者: fjdlgldg 时间: 2010-3-16 14:04

知识长了不少。

作者: ouoje 时间: 2010-3-16 14:07

感谢，感谢！！！

作者: maomi520 时间: 2010-3-16 14:42

感谢分享，看一下！

作者: bgwaste 时间: 2010-3-16 16:57

小中大非常感谢，学了不少。

作者: lfm20091102 时间: 2010-3-16 20:59

:) :)

作者: liuyuedetuzi 时间: 2010-3-17 14:31

感谢，学习，谢谢

作者: drywell 时间: 2010-3-19 15:55

作者: long2tong1 时间: 2010-3-21 10:09

感谢，收获不小。

作者: haoxiaojie 时间: 2010-3-21 15:16

呵呵，谢谢了

作者: slx8 时间: 2010-3-21 20:09 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

对于我们初学者，这太有用了

作者: ghl0415 时间: 2010-3-28 20:21

HPLC分析样品的原则

作者: lucxx 时间: 2010-3-31 21:15

非常好的帖子，学习。

作者: elaineT88 时间: 2010-4-1 12:23

感谢！！！

作者: iwangfang 时间: 2010-4-9 09:38

xiexie

作者: guowei 时间: 2010-4-9 22:38 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

非常感谢啊，想学习学习啊

作者: eveme 时间: 2010-4-25 20:45

非常感谢，学了不少。

作者: ren 时间: 2010-5-22 09:31

非常感谢，学了不少

作者: gaoting1736 时间: 2010-5-30 16:23

学习。。。。

作者: wy82 时间: 2010-6-23 19:24 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

作者: kk90laji 时间: 2010-6-29 15:25

thanks a lot

作者: 维拉2010 时间: 2010-7-7 11:51

作者: marilyn2010 时间: 2010-7-12 14:50

看看~~~~~~~~~~~~~~

作者: ruanch 时间: 2010-7-15 22:56

thanks very useful

作者: xinxianzw 时间: 2011-3-9 13:56

看得出来真的是实践中出来的总结，由衷感谢。

作者: deadog 时间: 2011-3-9 20:17

谢谢新人无比感谢老手的指导

作者: denoylu 时间: 2011-3-19 23:03

十分感谢，看看！！！

作者: 李娟娟 时间: 2011-3-20 22:17 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

谢谢楼主分享了

作者: a410731466 时间: 2011-3-21 07:47

hao yang de a

作者: chenhaiming066 时间: 2011-4-13 21:55

谢谢楼主分享！

作者: 方方土 时间: 2011-4-14 14:45

非常实用的经验，谢谢。

作者: pengcc31 时间: 2011-5-7 10:37

感謝樓主將經驗分享給大家

作者: 韩小兰919 时间: 2011-5-12 17:22

非常感谢，学习了！

作者: 小小朱 时间: 2011-5-18 13:36

感谢您的无私奉献！

作者: eagle360 时间: 2011-7-5 19:51

想学习学习

作者: tina860421 时间: 2011-7-11 15:45

非常感谢，学了不少。

作者: tina860421 时间: 2011-7-11 15:46

非常感谢，学了不少。

作者: surgelee 时间: 2011-9-3 17:15 标题: ok

ok，想进一步了解。

作者: surgelee 时间: 2011-9-3 17:16 标题: ok

ok，想进一步了解。

作者: shangzhiyujie 时间: 2011-9-13 19:30 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

真的是高手啊！！

作者: zhghydxtxt 时间: 2011-9-14 21:29 标题: 感激你啊

感谢楼主的辛苦分啊，学海无涯

作者: menghuan1113 时间: 2013-4-9 08:56

学习了，非常感谢

作者: kakaThx! 时间: 2013-4-9 23:36

kaka, Thx!

作者: robertzg 时间: 2013-4-30 14:36

好像很有经验那

作者: wuqiangcuixiao 时间: 2013-5-1 06:27

经验之谈呀不错不错

作者: lihui679 时间: 2013-5-3 09:24

谢谢楼主分享，学习之。

作者: jordanlau 时间: 2013-8-26 16:05 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

可以做到，日常维护重要！

作者: wmfdx2009 时间: 2013-8-26 17:12 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

不错的经验，好好学习天天向上。

作者: tianxiao9 时间: 2013-9-15 18:03

支持楼主，

作者: 地天泰 时间: 2013-9-19 23:19

感谢共享，学习之

作者: xflb 时间: 2013-10-23 22:40

谢谢楼主分享，看看有用没

作者: yanyy75 时间: 2013-11-14 18:43 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

内容非常实用，感谢分享

作者: yanyy75 时间: 2013-11-14 19:22 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

极性化合物更适合用正相色谱，非极性更适合用反相色谱。是不是搞错了？

作者: zjpzyyb 时间: 2013-11-23 09:34 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

谢谢楼主的无私奉献，正急需呢

作者: zhfxx 时间: 2013-12-7 13:56 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

学习了，谢谢......

作者: 李达 时间: 2014-4-20 03:30

关注一下！！

作者: klmk2005 时间: 2014-5-7 09:14 标题: 回复 #1 kflsjjfdl 的帖子

很不错的经验，学习了！

作者: yika396925632 时间: 2014-5-13 16:59

:) :) :) :) :) :) :) :) :) :) :)

作者: lujun0337 时间: 2021-3-16 20:57

非常感谢，学到很多东西

作者: 123PNWZDL 时间: 2021-4-16 15:17 标题: 注意丨选对汽油标号很重要

当今社会，汽车已普遍成为人们越来越离不开的交通工具，随着汽车被广泛使用，对各种标号汽油的需求量也与日俱增。目前各大城市使用国Ⅵ标准的92号、95号、98号三种标号汽油。大多数车主都不清楚各标号汽油是如何划分的，高标号的汽油就一定好吗？车主选择高标号汽油不仅多花钱，可能还会出现因加错标号汽油导致车辆发动机损坏的情况。那么不同标号的汽油区别在哪里呢？
01汽油抗爆性能不同
汽油的标号代表的是油品的辛烷值，标号高的油品也就代表着辛烷值高，辛烷值高的油品，这种汽油的抗爆性能也就更加的出色，这样汽车的发动机在运行上面也就能够更加的平稳，还能减少汽车磨损，同时对发动机也有更好的保护性，因此高压缩比的发动机需要使用高标号的汽油。
02燃烧值不同
高标号汽油，在燃烧值上面更加的出色，能够在高压缩比发动机下燃烧，同时能够提高汽油的燃烧效率，这样能够降低油耗，但如果在低圧缩比发动机下燃烧高标号汽油，会导致汽油燃烧不充分，造成浪费。
03环保功效不同
高标号汽油更加的环保，这种油品里面的烯烃含量更低，这样不容易产生油垢，尾气的污染程度也就会相对的更加小一些，所以更加的环保。

总结以上：高压缩比的发动机不能使用低标号汽油，因为低标号汽油的抗爆性差，容易产生爆震（通常表现为发动机异常抖动），从而造成输出功率下降、机件受损、以及行驶无力等异常情况，严重时可能会损伤发动机；而低圧缩比的发动机使用高标号汽油，除了在清洁和低碳方面会稍好一些，不仅会造成汽油燃烧不充分，而且对汽车动力没有任何帮助。由此可见，不同压缩比的发动机使用相对应标号的汽油，才能达到最好的效果。
那么究竟如何选择汽油标号呢？
厂家在研发和匹配发动机时，一定会经过对发动机的实验，调校以及路试等环节。因此，选择汽油标号时按照厂家的要求即可。
谱尼测试作为国内知名的大型第三方检验认证构，具备完善的油品检测能力，可在油品质量、技术改进等方面为您提供高水准的技术支持。目前可开展车用汽油、车用乙醇汽油、机动车发动机冷却液、润滑油、车用汽油清净剂、车用乙醇汽油调和组分油、变性燃料乙醇、车用尿素等多种产品的全项目标准化检测服务。为客户提供全方位的检测服务和解决方案。
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作者: 小爱%/44 时间: 2021-7-25 20:45

很好学到了

作者: 小爱%/44 时间: 2021-7-25 20:46

很好学到了

作者: 小爱%/44 时间: 2021-7-25 20:46

很好学到了

作者: 小爱%/44 时间: 2021-7-25 20:46

很好学到了

作者: 18724070199 时间: 2022-10-1 20:01

谢谢楼主分享！

作者: chenzhen2016 时间: 2023-7-8 16:27

谢谢分享

作者: 13388291453 时间: 2023-7-20 09:03

:) :)

作者: 13388291453 时间: 2023-7-20 09:03

:) :)

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