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标题: 【求助】大肠杆菌发酵OD值问题 [打印本页]

作者: sobi 时间: 2016-3-5 15:30 标题: 【求助】大肠杆菌发酵OD值问题

求助大神，制作重组大肠杆菌菌种，发酵。在制作种子的过程中，会用甘油保存种子供发酵使用，请问保存的时候种子的OD值为多少？

作者: eor 时间: 2016-3-5 15:32

直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？

作者: HP007 时间: 2016-3-5 15:32

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直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？

请问斜面在多少度保藏呢？

作者: chenshuanhe 时间: 2016-3-5 15:33

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请问斜面在多少度保藏呢？

我们一般都-20度保藏，可以随时拿来用的，如果想放置时间更长些就液氮保藏。

作者: fangxiang 时间: 2016-3-5 15:33

可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.

作者: ztonyc 时间: 2016-3-5 15:34

一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。

作者: sobi 时间: 2016-3-5 15:34

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一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。 ...

od测方法，我们是稀释6-8倍左右，波长600直接测？我们结果都6左右，是怎么回事，是因为测的方法不同吗

作者: sobi 时间: 2016-3-5 15:34

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原帖由 fangxiang 于 2016-3-5 15:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.

你测OD方法有什么注意点吗？

作者: 45778 时间: 2016-3-5 15:35

无所谓，肉眼浑浊就可以了。

作者: ququer787 时间: 2016-3-5 15:35

在0.5-0.8之间，大约从平板上挑取单菌落，在LB培养基中培养2-2.5小时左右；

作者: 17585602016 时间: 2024-1-3 20:05 标题: 大肠杆菌cfu在10^9左右的OD600

大概要培养多久?OD值大概是多少？

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