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标题:[总结帖]细胞版疑难帖

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发表于 2012-8-30 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
猪的常见细胞系有那些？谢
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-8-30 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

PK-15  来源猪肾脏细胞  
就知道这一种
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-8-30 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1) HT-1080 猪肾细胞系 上皮样细胞
2）ST 猪睾丸细胞系 成纤维样细胞
3）IBRS-2 猪肾细胞系 上皮样细胞
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-8-30 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一些猪细胞系
ESK-4 猪肾正常上皮细胞
PT-K75 猪鼻甲骨纤维原细胞
LLC-PK1 猪肾正常上皮细胞
LLC-PK1A 猪肾正常上皮细胞
PK-2a/CL 13 猪肾上皮细胞
PK13 猪肾上皮细胞
PK(D1) 猪未知组织细胞
以上细胞来源：
cuturl('www.atcc.org')

还有一些猪原代细胞:
1，猪冠状动脉内皮细胞(PCAEC)
2，猪肺动脉内皮细胞(PPAEC)
3，猪大动脉内皮细胞(PAOEC)
4，猪冠状动脉平滑肌细胞(PCASMC)
5，猪肺动脉平滑肌细胞(PPASMC)
6，猪大动脉平滑肌细胞(PAOSMC)
细胞来源：
cuturl('http://www.cellapplications.com/AnimalC.html')
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gogo[使用道具]
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发表于 2012-8-30 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我即将做细胞杀伤实验，虽然现在还没有NK92细胞，但是我想哪位大侠能够指导一下该细胞的培养条件有什么特点？
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2012-8-30 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 gogo 于 2012-8-30 18:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我即将做细胞杀伤实验，虽然现在还没有NK92细胞，但是我想哪位大侠能够指导一下该细胞的培养条件有什么特点？

自然杀伤 ( natural killer,NK)细胞系NK-92是1992年从非霍 奇金淋巴瘤患者的外周血淋巴细胞中分离出来并建系成功的一种自然杀伤细胞系,具有与人NK细胞相似的表面分子特征和功能特点,可在体外长期培养、大量扩增,并对多种肿瘤细胞具有杀伤活性。

NK292 细胞
培养条件：一般培养于α-MEM培养基(含12.5%新生牛血清、12.5%马血清、100 U /ml rh IL-2),
培养方法：常规，37℃、5% CO2 孵箱中培养。
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发表于 2012-8-30 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的试剂是今年5月份买的，现在它出现了沉淀，量不是很多，我用了两次往Vero转绿色荧光蛋白但是效率很低，不知道是不是这个原因，大家遇见过这种情况吗？试剂还能不能使用啊？还有大家有没有往Vero转绿色荧光蛋白的经验啊，能不能提示我一下关键步骤啊？我做过梯度用来确定质粒和试剂的最佳比例但是效率都很低，我的质粒的纯度很好，应该不是这方面的问题。很希望得到大家的帮助，谢谢了
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发表于 2012-8-30 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你可以混合一下，看是否还能均质。如果不匀质，还是别用了，可以打电话问问试剂公司。
转染的最关键是比例，与质粒的大小有关系。
另外一个关键是转染液与细胞的接触时间不能太长。我一般3小时后，就每20分钟看次细胞，当细胞稍变圆时，就换上培养液。因为lipofection对细胞的毒性很大。说明书一般要6-8小时，我试过，转染很低。
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发表于 2012-8-30 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

质粒和脂质体结合的时间可以延长一点。它说的是6个小时稳定。所以建议时间延长到2个小时，然后再传
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 小中大

我现在在养 293T cell，有一些问题想请教：293T是不是传十代以上转染效率 就不好了 ，另外293T cell用什么试剂转染比较好（我看一些用磷酸钙转染，不知道它的优点是什么？）
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