[总结帖]细胞版疑难帖 - 经验共享

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [总结帖]细胞版疑难帖

369 14/37 |‹‹‹12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 ›››|

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[总结帖]细胞版疑难帖

KGZ564[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74472
精华 0
积分 452
帖子 583
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态离线

131

发表于 2012-8-30 18:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

传10代以上转染效率还行
我用脂质体2000转染，转染率跟头几代没差多少。

不过做转染以来细胞总是熬不到48h。无法收集病毒上清，借贴求教大侠！！

二子[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 76464
精华 0
积分 208
帖子 155
信誉分 100
可用分 1531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态离线

132

发表于 2012-8-30 18:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在20代后转染效率就下降很多，15代前最好。
我也用脂质体2000，但由于其毒性，要早4小时左右就换掉转染液。

langlang[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77033
精华 0
积分 668
帖子 976
信誉分 100
可用分 5741
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态离线

133

发表于 2012-8-30 18:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在20代后转染效率就下降很多，15代前最好。
我也用脂质体2000，但由于其毒性，要早4小时左右就换掉转染液。

——————————————————————————————————————————————————————

我用lipo 2000转，24 h不换液也没有一点问题~是不是现在lipo 2000质量好了。

moonlight45[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79769
精华 0
积分 487
帖子 654
信誉分 100
可用分 4096
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态离线

134

发表于 2012-8-30 18:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问养该细胞有什么要求，我养的细胞贴壁困难，请问有什么办法？

viviwang1987[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 77490
精华 0
积分 458
帖子 636
信誉分 100
可用分 3953
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态离线

135

发表于 2012-8-30 18:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Eahy926细胞培养没有什么特殊的，都是采用常规细胞培养条件：
RPMI-1640完全培养基（含10％FBS,青霉素100U/ml，链霉素100 微克/ml）。37℃、5% CO2 孵箱中培养。
当细胞呈亚融合后，用0.25%胰酶－0.02％EDTA消化。

至于你说细胞贴壁困难，我觉得如果你的培养方法没有问题，请确认以下几点：
1，细胞是否还活着；
2，如果还活着，是否有污染；
3，如果还活着，也没有污染，请确定消化是否时间过长，造成细胞受损，影响正常贴壁。

mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态离线

136

发表于 2012-8-30 18:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我正在养这种细胞，还是挺好养的，按一般的养贴壁细胞的方法就可以，不过培养基最好家ＨＴ（ＨＡＴ）如果不加的话，细胞要退化！

ffooll[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 73418
精华 0
积分 437
帖子 574
信誉分 100
可用分 3666
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态离线

137

发表于 2012-8-30 18:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你好！请问不加HAT要退化是什么意思？如何加？