小中大各位朋友你们好:
我现在裂解细胞提出胞浆和胞液的某个蛋白,需要细胞骨架 缓冲液(CSK Buffer),但我看了些资料,有的差别很大, 不知道那里提供的准确。
另外是否有买配制好的?
版本1:0.5% Triton X-100 ,5mMNaCl, 10mM Pipes, 3M MgCl2, 300mM sucrose and protease inhibitor cocktail tablets
版本2:CSK buffer (50 mM NaC1,10 mM Pipes, pH 6.8, 3 mM MgCI2, 0.5% Triton X-100, 300 mM sucrose,1.2 mM PMSF, 10 ~g/mi leupeptin)
版本3:CSK-TritonX-100 细胞骨架缓冲液:10mol/L PIPES,100mol/L KCl,300 mmol/L sucrose, 3mmol/L MgCl2, 1mmol/L EGTA,1.2mol/L PMSF,2mg/L aportinin, 0.5%(v/v) Triton Ⅹ-100, pH 6.8],
版本4:1% Triton X-100, 1% Nonidet P-40, 0.2 mmol/L leupeptin, 10 mmol/L Pefablock, 2.77 nmol/L aprotinin, 10mmol/L NaF and 1 mmol/L NaVO3 in PBS)
版本5:10 mmol/L PIPES, 100 mmol/L KCl, 300 mmol/L蔗糖,3 mmol/L MgCl2, 1 mmol/L EGTA, 1.2 mmol/L PMSF,1% TritonX-100, pH=6.8
很多版本 ,我看了一下,主要是在NaCl的浓度上,有的还有加KCl,请问高手, 那个好一些。
另外M-缓冲液作用是什么?? 是相当于CSK 缓冲液吗?