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最近做大分子200KD的蛋白,显色后条带不是窄条状的,而是沿着泳道散开成 一片,成竖带状的了,原因分析下
因为是200KD的,我用的6%的胶,电泳2个小时到溴芬兰出了胶停止的
以前有次用10的胶跑下来条带很漂亮,难道因为6的胶比较稀,蛋白压缩不好,电泳时间长了蛋白弥散开了?/??
选择湿转了2次,300ma/2.5h,转完预染marker都不是很清楚,立春红也没看见,转膜液是tris 25mM,Gly 192mM,Met 20%,SDS 0.1%,加水到1L,正负绝对没错,三明治也没问题,只好换半干1.5h, 预染marker转过去了,结果显色后就是楼上那样,郁闷