蛋白质与蛋白组学

我做的蛋白条带间总是有连接,不好看.有的还弯弯曲曲的.是因为加样时太满溢出来的原因吗?上样量一共14微升,多吗?大家有什么好办法可以使条带之间有空隙,怎样做才能又直又齐呢?

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可能是上样量过多或者加样时太快，蛋白溢出来了。如果做0.75的板子，可能出现这种情况，建议上样量大时做1.5的板子。弯弯曲曲可能是你配胶时没有摇匀，我的经验是加AP,TEEMED前后都要摇匀，这样做出来的胶跑出来的条带才漂亮。还要注意SDS出现混浊也不要用了。

显影问题请教：

我最近做了一次WB，结果发现：同一张膜，我在孵育3min后，分别压了两张胶片（上右为图1，压片 2min和上左为图2，压片8min）；然后又继续再压了5min（见下右图3）。请教各位战友，这三张图出现了不同趋势的结果（同一张膜），哪一张图片更加可靠，请多多指教，谢谢！！！

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你的蛋白是有两个条带的吗？如果不是，建议你压多张片子时下面的片子用双面胶固定，不然拿上面的片子可能挪动下面的片子，造成重影。