蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】双向电泳总是跑不好,帮忙看看我的图

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【求助】双向电泳总是跑不好,帮忙看看我的图

youreyes[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107975
精华 1
积分 461
帖子 578
信誉分 102
可用分 3691
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
1
 

【求助】双向电泳总是跑不好,帮忙看看我的图

双向电泳总是跑不好,帮忙看看我的图。谢谢各位大侠!!


查看积分策略说明
附件
2013-12-20 10:55
22700009.jpg (47.16 KB)
 
顶部
youreyes[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107975
精华 1
积分 461
帖子 578
信誉分 102
可用分 3691
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
2
 

还有一张图,新手,大家包涵啊!


查看积分策略说明
附件
2013-12-20 10:55
30926527.jpg (41.79 KB)
 
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
3
 

条件写清楚点啊。。
就一张图没啥好说的。。。 的确不怎么好
没其他条件没法给建议
顶部
PINK[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73133
精华 0
积分 418
帖子 536
信誉分 100
可用分 3488
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
4
 

这是7cm的胶条么......聚焦不良,而且有核酸污染
顶部
is2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75851
精华 0
积分 510
帖子 680
信誉分 100
可用分 4233
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
5
 

上面是18cm的胶,TCA/丙酮法,裂解液尿素8M 硫脲2M CHAPS 4% DTT 60 mM
PMSF 0.5mM,聚焦过程都很顺利
顶部
is2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75851
精华 0
积分 510
帖子 680
信誉分 100
可用分 4233
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
6
 
若加核酸酶可以去除核酸吗?一般用量是多少
顶部
2541[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75124
精华 0
积分 742
帖子 1144
信誉分 100
可用分 6580
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
7
 
LZ18CM的胶条 点的数量还是这么少的话 按TCA/丙酮法明显是样品制备有大问题。
裂解液的配方实际上都差不多的
LZ的问题还是在样品制备
另外核酸酶可用可不用
大多数时候我都没用过。
顶部
pengke1983[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78619
精华 0
积分 470
帖子 639
信誉分 100
可用分 3986
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-1
状态 离线
8
 
如果说是TCA/丙酮法沉淀蛋白,核酸酶基本可以不用.你的上样量是多少啊
顶部
youreyes[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107975
精华 1
积分 461
帖子 578
信誉分 102
可用分 3691
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
9
 

上样量6mg/ml,我重复做了5次。每次基本上都有重复提蛋白,但是每次都是出的横竖条纹,基本都上边的图的样子,基本上没点。
谢谢大家的帮助!!!!
顶部
wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
10
 

上样量6mg/ml,18cm胶条如果我没弄错的话上350ul到400ul,就是你一张图上上了至少2mg蛋白,推荐上样量应该是1mg吧,这么大的上样量会不出现横纹么?
顶部