【求助】出现了比较诡异的条带 - 经验共享

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标题:【求助】出现了比较诡异的条带

redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-2-8 13:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有个关键的问题：是不是你把胶染完色又去转膜，这样很有可能中间目的蛋白损失。我们染完的胶一般就扔了……

911[使用道具]
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发表于 2014-2-8 13:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 redbutterfly 于 2014-2-8 13:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
有个关键的问题：是不是你把胶染完色又去转膜，这样很有可能中间目的蛋白损失。我们染完的胶一般就扔了……

没有的。我是用了两块胶，一块是用来转膜，一块是用考马斯亮蓝染色了。帮我想想有无其他的可能。多谢啦！

911[使用道具]
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发表于 2014-2-8 13:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我又把那张膜从新孵育上一抗结果没有任何条带出现啊、考马斯亮蓝染色凝胶上有蛋白，也不知道什么原因会现出来上一次的怪异的条带

vera+[使用道具]
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发表于 2014-2-8 13:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

逐步排查
因为我看你的胶染的不错，不知道你marker对应的值，但是蛋白肯定有，问题在转膜之后啊，建议你把膜用考马斯亮蓝染色一下，如果有规则的条带，那肯定是抗体和显色的问题了。如果条带就是畸形的或者没有，那就是你转膜的问题。
我看你胶转的挺干净的，会不会是转膜过头了。只是猜测。

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