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以下是一些我个人在实验过程中的体会，与大家分享一下，希望对各位实验有所帮助：
1. 细胞活力：原代心肌细胞活力是第一重要的，如果分离得到的细胞活力高，即使细胞密度偏高或偏低，也可以检测到较好的IMP和FP信号，但若细胞活力偏低，对细胞密度的要求就会比较苛刻，必须在一定的范围内，细胞才能跳的比较好，但是持续时间会比较短。
2. 心肌细胞跳动状态好不好主要由两个方面组成，一个是连续跳动持续时间，另外一个是跳动幅度（跳动力度），这两个因素主要由细胞活力和换液时间所影响，细胞活力更高，连续跳动持续时间和跳动幅度也会更长更高，换液时间间隔过长也会使细胞跳动减弱。
3. 在Cardio Device上一般种植密度为17K，在CardioECR Device上一般种植密度为24K，浓度差异主要是因为在100hr以上，细胞的跳动状态就会变得不太稳定，但17K密度在100hr以上FP信号一般比较弱，所以通过提高细胞密度来获得更强的FP信号，但是密度过高细胞又跳动不起来，所以必须维持在一个浓度范围内，我们一般选择24K（这个细胞浓度可能会因个人的计数方式而略有偏差）。
4. 在取心脏过程中，手术剪刀和镊子等器械必须经过酒精棉球擦拭干净后才能放在酒精灯下烘烤，如果手术剪刀和镊子等器械上沾有血渍或溶液，这时在酒精灯下烘烤会使这些物质碳化和焦化，产生碎小的毒性物质，影响细胞活力；一般放置酒精灯外焰烘烤，持续3-5s，如果时间过短，温度没有上升，起不到杀菌效果。
5. 剪开胸腔时，从颈部肋骨往下数三根，用大剪刀剪开，开口可以更大一些，快一些，一刀即可暴露心脏（快，准，狠 为三字要诀），如果开口较小，再用眼科剪刀剪开一些，轻轻拔开心包膜，让心脏跳出胸腔，再剪掉放入冰浴的无血清培养基，迅速挤掉心脏内的血液。
6. 所有试剂开口即用，用完即关，切勿在台内裸露过久。加样槽放置右前方，废液缸放置左前方，正前方放置试管架，操作区域放置DEVICE等，任何物品或操作绝对不允许从加样槽和开口的试剂上方穿过，因为我们的试剂均无抗生素，切记！
7. 获取的心脏在剪碎时，使用锋利吻合度好的眼科剪刀，可以半年更换一次（根据使用频率也可调整），在剪碎过程中，保守估计在30次以上，剪碎至2-3mm左右即可，这个过程中，记住如果有大块组织，可以将其挑出剪小，保持组织块大小较为均一，不要剪得过小。
8. 消化液的使用量，消化次数总计12次，前面8次可以维持3-5ml的量取消化，后面4次减半消化，前面8次可以多摇动几次，使用暗劲，将组织块在消化液中尽量散开，后面4次，轻轻摇柔几下，当取出消化液时，切勿摇动。
9. 消化组织吹打：在吹打获取细胞悬液的过程中，吸管一定要放置液面以下，不要产生气泡，使用暗劲将培养基保持在一个节律吹打，不要过快过慢，让培养基流动带动组织块内的细胞掉落下来；第一次吹打一定要轻柔，次数维持在5-6次即可，第二次可以快一些，猛一些，吹打次数大约在10次，第三次可以再用点力，吹打次数大约在15-20次。
