细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】心肌细胞培养互助

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 422  5/43 |‹‹‹3456789101112›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】心肌细胞培养互助

vcve[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76131
精华 0
积分 743
帖子 1043
信誉分 101
可用分 6126
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
41

发表于 2015-5-11 19:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
因为实验室没有做过心肌细胞，所以遇到很多问题。我还想请教一下大家，再造心肌细胞缺氧再给氧的模型时有没有比较简单的方法，我看文献上好多都用体外缺氧，需要买N2罐，而我们实验室没有这个仪器。可不可以用其他的方法代替呢？希望大家能给我指点。
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
42

发表于 2015-5-11 19:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般用DMEM/F12，20％小牛血清。
顶部
#甜#[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72838
精华 0
积分 300
帖子 319
信誉分 100
可用分 2361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
43

发表于 2015-5-11 19:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我分离的细胞在培养第四天后就不再苗条了，个个呈摊鸡蛋的模样，伸展开了，请教各位高人这种情况如何解释，是正常现象吗？
顶部
tewank[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114488
精华 1
积分 229
帖子 173
信誉分 102
可用分 1561
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
44

发表于 2015-5-11 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有博动吗?
细胞的密度大吗?
如果细胞比较疏的话 失去了解除抑制 是可以变成球体得
个人看法
顶部
xevin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76455
精华 0
积分 799
帖子 1176
信誉分 101
可用分 6807
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
45

发表于 2015-5-11 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做的是乳鼠心肌成纤维细胞,刚分离下来时密度不大，到第四天摊开了，并且原来一些贴壁的但没伸展的小圆型细胞都漂起来了，感觉密度大了，也许细胞复制了？我想知道你们做的细胞也都摊成鸡蛋饼样吗？
顶部
wzqzy[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114512
精华 0
积分 250
帖子 240
信誉分 100
可用分 1932
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
46

发表于 2015-5-11 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用激光共聚焦测心肌细胞内钙时，不知处理因素作用多久后的心肌细胞最适合做该实验？
顶部
redbutterfly[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76433
精华 0
积分 701
帖子 1102
信誉分 100
可用分 6281
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
47

发表于 2015-5-11 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我在养乳兔的心肌细胞,我的方法是取乳兔心脏俩个,剪成小的组织块后,置入10ml 0.1%的胰酶中,消化10分钟,弃上清,再加入胰酶8ml,消化10分钟,自然沉淀1分钟后,取上清入另一离心管中,加入含血清的培养液终止消化,反复6-8次,将离心管中的上清1000转离心5分钟后,加入培养液,吹打后培养1-2小时,待成纤维细胞贴壁后,再将培养液倒入另一培养皿中,进行培养.也就是所谓的差速培养法.
问题是:培养2小时后,镜下观察未见有成纤维细胞贴壁,无法进行差速培养,结果三天后,贴壁的细胞全是成纤维细胞.请大家帮我分析以下原因!!!!!
谢谢!急,老板让我月底前培养出来,现在已经过了三分之一了!!!!救命!
顶部
queen[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72228
精华 1
积分 361
帖子 337
信誉分 102
可用分 2571
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-6
状态 离线
48

发表于 2015-5-11 20:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教各位前辈： 成年大鼠心肌分离和人的心肌分离哪种成功率高些？
顶部
queen[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72228
精华 1
积分 361
帖子 337
信誉分 102
可用分 2571
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-6
状态 离线
49

发表于 2015-5-11 20:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
成熟心肌分离后可建立缺氧/复氧模型吗？
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
50

发表于 2015-5-11 20:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
激光共聚焦测钙，处理因素作用多久的心肌细胞适合做试验，这个问题得自己先做一部分预试验。因为荧光探针的浓度，放置时间的长短，都会影响观测，所以没隔一段时间开始试验前，都要先做预试验，把探针的最佳浓度和作用时间摸好。然后再在此基础上观测加药后的作用时间。比如加药后，每隔1－2分钟或更短时间，测一次内钙，做出时间曲线，根据时间曲线，找出药物作用的最佳时间。这样在预试验把所有条件摸好后，再进行正式试验就很顺利了。预试验对很多试验研究很重要。
顶部
 422  5/43 |‹‹‹3456789101112›››|