小中大前辈好。我也有考虑过测之前换液,不过说明书上说酚红对检测不影响,就偷懒没有换。不过想请问换液是直接用吸管将废液吸走吗,要吸很干净吗?
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枪头吸会更干净些哦!操作熟练后基本可以控制每次的实验误差在10%或20%之内。
检测之前最好镜检,要相信自己看到的,而不是一味遵从比色数据。我就是因为每次镜检,才会发现很多显色液使用过程中的问题,再加以改进,直到理论数据与实际看到的相符。不要怀疑自己的能力,有时候只是细节方面没有做好罢了,我们一味照本宣科了,太迷信产品说明,没有做足预实验。
说下最近遇到的问题,也许会对一些人有些帮助。测活用的细胞株的药物敏感度是最重要但是也是很容易被忽视的问题。如果你不是用原代的话,商品化的细胞株有个很致命的问题就是细胞代次。测活用的细胞不能有所变异或者功能退化,这很致命,但这是不停的传代必然导致的问题。我一直坚持认为要用从ATCC购买的细胞,在小代数以内尽可能冻存尽量多的细胞。这回贪便宜在某院细胞所买了一株未知代数的细胞株(再具体就不说了,大家心里明白啊,呵呵),我花了大半年时间几乎没有任何实验结果,最后用干扰素一测,该细胞压根儿没有反应……崩溃了!挨了很多批评不说,自己的信心差点丢失了。现在又要花两个月的时间去买ATCC的细胞,真的很得不偿失的。说下ATCC的细胞价格,官网价格乘以18,就是人民币的价格,代理商么大陆就一个,我就不作宣传了,大家可以自己去查。最好走正规代理商,运输历时近两个月,小代万一出问题了,赔偿问题很纠结的。如果你的产品最后需要申报,细胞来源也需要证明,当然走正规渠道比较放心些。
我又废话多了……^_^