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标题:[分享帖]CCK8试验~。~菜鸟篇

吴才子[使用道具]
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回复 #40 zhezhe 的帖子

我今天特意把塑封都留下来了,后天加药的时候用紫外照照应该可以试试。嗯,多多交流啊。一直觉得那句话说的好,不要怀疑自己的能力,只是有些细节没做好而已。加油。
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caihong[使用道具]
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顶楼主 我也一种在用cck8 还是蛮好用的,一般的体系也就是200ul +10ul 试剂,孵育2h检测 ,要是不小心吹出气泡 我就用烧热的针头把它们干掉,呵呵
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rxcc33[使用道具]
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顶楼主 我也一种在用cck8 还是蛮好用的,一般的体系也就是200ul +10ul 试剂,孵育2h检测 ,要是不小心吹出气泡 我就用烧热的针头把它们干掉,呵呵

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仁兄你好啊,我做的也是200μL,可是CCK8的技术员都说要加10%,也就是20μL才行啊,你为什么加10μL啊?谢谢赐教啊!
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rxcc33[使用道具]
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请教楼主,你的200μL加10μL还是20μL?
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hyuu[使用道具]
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请问楼主,我是100微升体系,做了空白组(100微升培养基+10微升CCK8),对照组(90微升细胞悬液+10微升溶药介质+10微升CCK8),加药组(90微升细胞悬液+10微升药物+10微升CCK8)。加药处理24H,48H,72H小时测OD,但大概是0.2~0.4,这样的数据有效吗?比你说1.0低了很多,是细胞数量接种少了?还是其他原因?细胞24H后贴壁了。用的细胞是HEK 293T
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穿越时空[使用道具]
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仁兄你好啊,我做的也是200μL,可是CCK8的技术员都说要加10%,也就是20μL才行啊,你为什么加10μL啊?谢谢赐教啊!

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主要是我每次检测细胞都比较多 所以加20ul颜色比较深 容易超出酶标仪的检测范围,所以就加10 因为一直结果也蛮稳定的 而且我只需要一块板同比的数据,所以影响不大。不过一般还是按人家推荐的比较好吧
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rxcc33[使用道具]
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请教楼主,96孔板,给细胞换液,什么方法比较好啊?可以避免细胞损失。
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吴才子[使用道具]
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回复 #47 rxcc33 的帖子

我试过楼上同学说的甩板,我觉得还不错。你可以试试,换完之后在镜下看看细胞是否损失。前提当然是你的细胞已经贴壁完全。
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社会主义好[使用道具]
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谢谢各位,我正在做,看到帮助很大。

我想问下:96孔板培养细胞,我分别测24h 48h 72h 化疗药物对癌细胞的抑制作用。对于72h 组,需要换液吗?
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pengke1983[使用道具]
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楼主写的很好 我是一个将要做这个实验的初学者 但是我做的是悬浮细胞,我想问一下对于悬浮细胞,实验上要注意什么 谢谢指点了
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