[求助]DMEM(高糖)液体培养基的选择 急求！

最新回复

• glass (2012-3-21 16:49:23)

  DMEM : dulbecco's minimum essential medium 达尔伯克（氏） 必需基本培养基
  
  在干细胞的体外诱导分化培养中，所需的试剂包括胎牛血清、DMEM-F12培养基（内皮细胞生长培养基）、青霉素链霉素混合液以及各种诱导因子。所以是不是可以推断，DMEM使用的时候，是需要添加血清和抗生素的。
  
  供楼主参考

• any333 (2012-3-21 16:49:46)

  
  我觉得你可以先查一下美国细胞库（ATCC）推荐的相关培养基，如果没有任何经验，建议先按照细胞库推荐信息（培养基的种类和成分）选择合适的培养基。但是，如果实验室已经有过使用其他培养基进行培养的经验，也可以采用经验培养基，使用前注意对比相关成分的含量。

• 大尾巴 (2012-3-21 16:50:13)

  我觉得你可以先查一下美国细胞库（ATCC）推荐的相关培养基，如果没有任何经验，建议先按照细胞库推荐信息（培养基的种类和成分）选择合适的培养基。但是，如果实验室已经有过使用其他培养基进行培养的经验，也可以采用经验培养基，使用前注意对比相关成分的含量。
  
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  原先使用的都是GBICO的干粉培养基，实验室都没有用过液体培养基。就是不知道液体培养基和干粉培养基那个使用起来对细胞培养比较少，因为用量不大，用干粉的话一次过滤的量太多，要用很长时间，怕时间长了会不好。

• fei1226com (2012-3-21 16:50:35)

  我在用这个：DMEM 高糖 含L-谷氨酰胺，无丙酮酸钠 SH30022.01B 500ml
  
  加入10%血清，1%谷氨酰胺，1%双抗，即可使用，不过最好一个月内用完，所以每次配多少自己看需要来定

• fei1226com (2012-3-21 16:51:07)

  挺好的，养细胞就一直都用，貌似保质期一年还是怎样，所以一次不要买太多，根据实际需要订就好

• tieshazhang (2012-3-21 16:51:26)

  1.丙酮酸钠的放入培养基的目的是它可以解离释放二氧化碳，保证缓冲能力。因此在缺乏二氧化碳如密闭培养或细胞长途运输时比较合适，另外细胞拿出孵箱后暴露于低二氧化碳环境下，有丙酮酸钠可能有助于维持PH值。我认为只要孵箱二氧化碳浓度正常一般不需要丙酮酸钠，我养细胞没加这个也挺好。楼主可以根据培养细胞的具体情况考虑。
  
  2.不建议培养基加双抗。一方面，即使加了，仍要注意严格无菌操作；另一方面，如果无菌操作不严，可能发生潜在污染，而一旦实验需要换一个培养环境或撤除双抗则将变成显性的污染；另外，双抗可能对细胞特性有影响。
  
  3.我买的hyclone的液体培养基，都是经过了0.1um过滤消毒的，拿来开封加血清后可直接使用。

• 大尾巴 (2012-3-21 16:51:58)

  1.丙酮酸钠的放入培养基的目的是它可以解离释放二氧化碳，保证缓冲能力。因此在缺乏二氧化碳如密闭培养或细胞长途运输时比较合适，另外细胞拿出孵箱后暴露于低二氧化碳环境下，有丙酮酸钠可能有助于维持PH值。我认为只要孵箱二氧化碳浓度正常一般不需要丙酮酸钠，我养细胞没加这个也挺好。楼主可以根据培养细胞的具体情况考虑。
  
  2.不建议培养基加双抗。一方面，即使加了，仍要注意严格无菌操作；另一方面，如果无菌操作不严，可能发生潜在污染，而一旦实验需要换一个培养环境或撤除双抗则将变成显性的污染；另外，双抗可能对细胞特性有影响。
  
  3.我买的hyclone的液体培养基，都是经过了0.1um过滤消毒的，拿来开封加血清后可直接使用。
  
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  非常感谢！！那干粉培养基配制的时候需要加入双抗吗？

• am10 (2012-3-21 16:52:22)

  
  我现在也在养HepG2细胞，所选的培养基是DMED-H高糖的无丙酮酸钠，培养基包装打开后直接溶解，加10%血清，1%双抗和1%丙酮酸钠。加丙酮酸钠的目的一是起到缓冲体系的作用，二是可作为细胞的碳源，肝细胞主要进行能量代谢，需要大量的能量维持。我用了3个月了，还比较好使的。
  
  另外希望能够加楼主好友，能否互通一下hepG2细胞的照片，把hepg2养的更漂亮哈~谢谢