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[求助]为什么接了病毒的细胞会比对照长的更好?
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发表于: 2012-3-21 17:16 作者: baidukk 来源: 分析测试百科网
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[求助]为什么接了病毒的细胞会比对照长的更好?
我用vero细胞培养病毒,用可疑含病毒的材料上细胞,结果每次到7天左右,都是对照先脱了,这是什么情况啊?请高手们指点。
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[求助]为什么接了病毒的细胞会比对照长的更好?
我也来说两句
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flower-201
(2012-3-21 17:18:56)
首先确定你VERO细胞接种密度,在一般细胞培养过程中,很少有细胞养7天不换液/传代的,另外,还要确认你培养基的细胞血清浓度。
在《中国药典》关于细胞内、外源病毒因子检查——不同细胞传代培养实验过程中,要求接种样品培养后7天盲传,但培养基使用的不是完全培养基,而是维持培养基,建议使用2%FBS或者4%FBS的维持培养基,这样的血清浓度配合适合的细胞浓度,可是保证14天不换液。
细胞浓度需要根据你的培养瓶底面积进行摸索。
ALALA
(2012-3-21 17:19:19)
请检查病毒滴度,是否已经失活。一般接种病毒后2、3细胞就开始有变圆现象,5天时就可以收集了。
baidukk
(2012-3-21 17:19:55)
请检查病毒滴度,是否已经失活。一般接种病毒后2、3细胞就开始有变圆现象,5天时就可以收集了。
————————————————————————————————————————————————————————————————
如果病毒失活,可是接了病毒的细胞为什么会比对照的细胞活的更久呢?我的实验组和对照组除了病毒液,其余都是完全一样的,而且一小时还换液了。
baidukk
(2012-3-21 17:20:16)
首先确定你VERO细胞接种密度,在一般细胞培养过程中,很少有细胞养7天不换液/传代的,另外,还要确认你培养基的细胞血清浓度。
在《中国药典》关于细胞内、外源病毒因子检查——不同细胞传代培养实验过程中,要求接种样品培养后7天盲传,但培养基使用的不是完全培养基,而是维持培养基,建议使用2%FBS或者4%FBS的维持培养基,这样的血清浓度配合适合的细胞浓度,可是保证14天不换液。
细胞浓度需要根据你的培养瓶底面积进行摸索。
___________________________________________________________________________________________________________
我用的是2%的血清浓度,一般细胞也不会放那么就,我主要是想看是否出病变,但是意外的是对照组脱了。实验重复三次了,应该不会是个别情况
。
zsxan1990
(2012-3-21 17:20:36)
病毒可能不引起细胞病变,但能够抑制细胞的繁殖,这样你加入病料的细胞可能维持更长时间,建议你继续盲传几代,可能会产生病变,具体可以检测你可能怀疑的病毒进一步验证试试
yychen
(2012-3-21 17:21:37)
什么类型的病毒?
“用可疑含病毒的材料” 什么意思?
_______________________________________________________________________________________________________________
我理解,有些病毒能抑制细胞早期凋亡,因此反而短期存活寿命长。实验组比对照组长得好,未必是真的好。做病毒检测了吗?确定染毒了吗?
baidukk
(2012-3-21 17:22:04)
我不知道是不是有病毒,为了分出病毒才上的细胞。如果不能特异性的检测病毒,能不能有别的非特异的方法知道细胞是否感染病毒了呢?
baidukk
(2012-3-21 17:22:26)
我又从别的地方要了一瓶vero细胞,重新接毒,看看效果。
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[求助]为什么接了病毒的细胞会比对照长的更好?
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flower-201 (2012-3-21 17:18:56)
在《中国药典》关于细胞内、外源病毒因子检查——不同细胞传代培养实验过程中,要求接种样品培养后7天盲传,但培养基使用的不是完全培养基,而是维持培养基,建议使用2%FBS或者4%FBS的维持培养基,这样的血清浓度配合适合的细胞浓度,可是保证14天不换液。
细胞浓度需要根据你的培养瓶底面积进行摸索。
ALALA (2012-3-21 17:19:19)
baidukk (2012-3-21 17:19:55)
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如果病毒失活,可是接了病毒的细胞为什么会比对照的细胞活的更久呢?我的实验组和对照组除了病毒液,其余都是完全一样的,而且一小时还换液了。
baidukk (2012-3-21 17:20:16)
在《中国药典》关于细胞内、外源病毒因子检查——不同细胞传代培养实验过程中,要求接种样品培养后7天盲传,但培养基使用的不是完全培养基,而是维持培养基,建议使用2%FBS或者4%FBS的维持培养基,这样的血清浓度配合适合的细胞浓度,可是保证14天不换液。
细胞浓度需要根据你的培养瓶底面积进行摸索。
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我用的是2%的血清浓度,一般细胞也不会放那么就,我主要是想看是否出病变,但是意外的是对照组脱了。实验重复三次了,应该不会是个别情况。
zsxan1990 (2012-3-21 17:20:36)
病毒可能不引起细胞病变,但能够抑制细胞的繁殖,这样你加入病料的细胞可能维持更长时间,建议你继续盲传几代,可能会产生病变,具体可以检测你可能怀疑的病毒进一步验证试试
yychen (2012-3-21 17:21:37)
“用可疑含病毒的材料” 什么意思?
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我理解,有些病毒能抑制细胞早期凋亡,因此反而短期存活寿命长。实验组比对照组长得好,未必是真的好。做病毒检测了吗?确定染毒了吗?
baidukk (2012-3-21 17:22:04)
我不知道是不是有病毒,为了分出病毒才上的细胞。如果不能特异性的检测病毒,能不能有别的非特异的方法知道细胞是否感染病毒了呢?
baidukk (2012-3-21 17:22:26)
我又从别的地方要了一瓶vero细胞,重新接毒,看看效果。
[求助]为什么接了病毒的细胞会比对照长的更好?