细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]PBMC的培养！急救！

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 14  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]PBMC的培养！急救！

DNA[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73137
精华 1
积分 429
帖子 494
信誉分 102
可用分 3291
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
1

发表于 2012-3-22 14:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]PBMC的培养！急救！




培养PBMC的时候用多少孔的板子啊？每孔的细胞浓度大概是多少？都需要加那些营养因子？多长时间换一次液啊？
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
2

发表于 2012-3-22 14:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

PBMC不能像细胞株那样长期培养。只能短期使用。新鲜分离马上使用。
顶部
DNA[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73137
精华 1
积分 429
帖子 494
信誉分 102
可用分 3291
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
3

发表于 2012-3-22 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我需要用PBMC诱导细胞，所以必须要养活这群细胞。否则我的实验进行不下去。一周左右就可以了。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
4

发表于 2012-3-22 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你要用PBMC诱导什么细胞？直接诱导不行吗？为什么非要养一周后再诱导？一周后细胞都死光了。
顶部
DNA[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73137
精华 1
积分 429
帖子 494
信誉分 102
可用分 3291
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
5

发表于 2012-3-22 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们是要直接诱导，但是要保证他能活一周以上，否则诱导会失败的。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
6

发表于 2012-3-22 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

单纯培养一周后肯定不会剩多少细胞了。

我也不知道你怎么个诱导法，想诱导成什么，不过，你如果直接诱导倒是有可能让细胞存活一周以上的。
顶部
DNA[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73137
精华 1
积分 429
帖子 494
信誉分 102
可用分 3291
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
7

发表于 2012-3-22 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我就是用一种蛋白 诱导免疫抑制性细胞，就是直接用蛋白刺激PBMC，您有什么好的办法吗？谢谢指教。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
8

发表于 2012-3-22 14:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

什么蛋白？是已知的细胞因子吗？

诱导免疫抑制性细胞并不是如此简单，一种蛋白就能够搞定，实验不能想当然。
顶部
DNA[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73137
精华 1
积分 429
帖子 494
信誉分 102
可用分 3291
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
9

发表于 2012-3-22 14:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
事实上就是这样，应该不算是细胞因子，是已知的，我们实验室自己制备的。我现在在摸索蛋白浓度及细胞浓度。
顶部
whitesheep[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78856
精华 0
积分 825
帖子 1330
信誉分 100
可用分 7476
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-4
状态 离线
10

发表于 2012-3-22 14:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也在样PBMC，我什么因子也没有加，3天长的挺好，用1640
顶部
 14  1/2 12››