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[求助]PBMC的培养!急救!
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发表于: 2012-3-22 14:30 作者: DNA 来源: 分析测试百科网
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[求助]PBMC的培养!急救!
培养PBMC的时候用多少孔的板子啊?每孔的细胞浓度大概是多少?都需要加那些营养因子?多长时间换一次液啊?
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[求助]PBMC的培养!急救!
我也来说两句
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最新回复
bananapeople
(2012-3-22 14:30:33)
PBMC不能像细胞株那样长期培养。只能短期使用。新鲜分离马上使用。
DNA
(2012-3-22 14:31:07)
我需要用PBMC诱导细胞,所以必须要养活这群细胞。否则我的实验进行不下去。一周左右就可以了。
bananapeople
(2012-3-22 14:31:51)
你要用PBMC诱导什么细胞?直接诱导不行吗?为什么非要养一周后再诱导?一周后细胞都死光了。
DNA
(2012-3-22 14:32:07)
我们是要直接诱导,但是要保证他能活一周以上,否则诱导会失败的。
bananapeople
(2012-3-22 14:32:25)
单纯培养一周后肯定不会剩多少细胞了。
我也不知道你怎么个诱导法,想诱导成什么,不过,你如果直接诱导倒是有可能让细胞存活一周以上的。
DNA
(2012-3-22 14:32:42)
我就是用一种蛋白 诱导免疫抑制性细胞,就是直接用蛋白刺激PBMC,您有什么好的办法吗?谢谢指教。
bananapeople
(2012-3-22 14:33:35)
什么蛋白?是已知的细胞因子吗?
诱导免疫抑制性细胞并不是如此简单,一种蛋白就能够搞定,实验不能想当然。
DNA
(2012-3-22 14:33:58)
事实上就是这样,应该不算是细胞因子,是已知的,我们实验室自己制备的。我现在在摸索蛋白浓度及细胞浓度。
whitesheep
(2012-3-22 14:34:24)
我也在样PBMC,我什么因子也没有加,3天长的挺好,用1640
DNA
(2012-3-22 14:34:45)
你最长养了多久啊?你用的是孔板还是培养瓶啊?多少浓度啊?谢谢
guagua
(2012-3-22 14:35:09)
用24孔板,就3天,浓度接近10的6次,因为我还要加药物干预
DNA
(2012-3-22 14:35:25)
我用6孔板,浓度还没摸索好。我要养一周左右最好。你每孔加多少培养基啊?
guagua
(2012-3-22 14:35:43)
我用24孔板,每孔加一毫升培养基
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bananapeople (2012-3-22 14:30:33)
PBMC不能像细胞株那样长期培养。只能短期使用。新鲜分离马上使用。
DNA (2012-3-22 14:31:07)
我需要用PBMC诱导细胞,所以必须要养活这群细胞。否则我的实验进行不下去。一周左右就可以了。
bananapeople (2012-3-22 14:31:51)
DNA (2012-3-22 14:32:07)
bananapeople (2012-3-22 14:32:25)
单纯培养一周后肯定不会剩多少细胞了。
我也不知道你怎么个诱导法,想诱导成什么,不过,你如果直接诱导倒是有可能让细胞存活一周以上的。
DNA (2012-3-22 14:32:42)
我就是用一种蛋白 诱导免疫抑制性细胞,就是直接用蛋白刺激PBMC,您有什么好的办法吗?谢谢指教。
bananapeople (2012-3-22 14:33:35)
什么蛋白?是已知的细胞因子吗?
诱导免疫抑制性细胞并不是如此简单,一种蛋白就能够搞定,实验不能想当然。
DNA (2012-3-22 14:33:58)
whitesheep (2012-3-22 14:34:24)
我也在样PBMC,我什么因子也没有加,3天长的挺好,用1640
DNA (2012-3-22 14:34:45)
你最长养了多久啊?你用的是孔板还是培养瓶啊?多少浓度啊?谢谢
guagua (2012-3-22 14:35:09)
用24孔板,就3天,浓度接近10的6次,因为我还要加药物干预
DNA (2012-3-22 14:35:25)
我用6孔板,浓度还没摸索好。我要养一周左右最好。你每孔加多少培养基啊?
guagua (2012-3-22 14:35:43)
我用24孔板,每孔加一毫升培养基
[求助]PBMC的培养!急救!