瓶上写着"cell lysis buffer"
应该是处理取上清时混有的细胞吧,但细胞应该可以通过离心去除的吧?
说明书里写着"cells from culture extracts must be lysed before assaying according to the following directions"
utt0989 (2012-3-26 16:28:20)
可以使用上海生工的试剂盒
全蛋白提取试剂盒
Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit
产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀，酶活性分析，Pull down,EMSA等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂，可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质，本试剂盒可以使用50次。储存条件：2～8℃。
产品特点：
1．提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性；
2．整个操作过程只需要30分钟左右；
3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取；
4．避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性；
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
编号 包装 价格 产地
BSP003 50 Assays 520 生工
最新回复
ququer787 (2012-3-26 15:50:29)
我曾经做过，细胞用超声低温裂解后离心得到上清。
ququer787 (2012-3-26 15:51:01)
我用超声低温裂解细胞的，然后离心得到上清做ELISA
xueyouzhang (2012-3-26 15:51:40)
xueyouzhang (2012-3-26 15:52:19)
QUOTE:
流式能检测胞内蛋白吗？xueyouzhang (2012-3-26 16:25:02)
固定打孔细胞好做吗？对这技术不熟悉。
听有人说提细胞内蛋白也不复杂。
xueyouzhang (2012-3-26 16:25:40)
还是想做ELISA,请教高手指点。
dog002 (2012-3-26 16:26:03)
我想请教下流式的做法？我做小鼠蛋白，只有两个指标有FITC染色的试剂，其他的据说生物素染色，这种效果怎样啊
xueyouzhang (2012-3-26 16:27:05)
我看RD公司的ELISA试剂盒 里面有细胞裂解液，说明书上说是处理上清用的，不知道可不可以用来取胞内蛋白？
xueyouzhang (2012-3-26 16:27:44)
应该是处理取上清时混有的细胞吧,但细胞应该可以通过离心去除的吧?
说明书里写着"cells from culture extracts must be lysed before assaying according to the following directions"
utt0989 (2012-3-26 16:28:20)
全蛋白提取试剂盒
Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit
产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀，酶活性分析，Pull down,EMSA等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂，可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质，本试剂盒可以使用50次。储存条件：2～8℃。
产品特点：
1．提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性；
2．整个操作过程只需要30分钟左右；
3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取；
4．避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性；
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
编号 包装 价格 产地
BSP003 50 Assays 520 生工
[求助]用于ELISA的细胞内蛋白提取方法？