[求助]MTT实验结果：本是细胞生长抑制剂，但实验组的OD值...

最新回复

• shenkunjie (2012-4-03 17:23:05)

  
  MTT也是有一定量的。细胞数量不同，同样细胞数接触到的MTT量就不一样。而MTT浓度越高，细胞染色越深。所以经常遇到这样的情况，细胞数明显少了，可MTT测出的OD值却一样，如果细心的话你可以发现，细胞少的那组，单个细胞的染色很深。所以如果细胞数不是有很大的差别，MTT是看不出来的。
  计数吧，呵呵

• guagua (2012-4-03 17:23:41)

  
  我也遇到相同问题，后来我猜想有可能是加进去的试剂有其他引起OD值增高的东西，不知道是不是这样。

• shenkunjie (2012-4-03 17:24:19)

  
  一般据说是有还原性的化合物会引起MTT值偏高。

• gogo (2012-4-03 17:24:40)

  如果排除还原性的原因，有可能是你的药物目除菌吧……污染的情况下，OD值会偏高的

• woshituzhu (2012-4-03 17:25:16)

  MTT 原理是活细胞的琥珀酸脱氢酶将MTT还原产生紫色甲月赞，如果你的药物是强还原剂如NAC就会与MTT反应，当然这种情况不多。还有你你可以仔细观察单个细胞，如果给药组细胞内部紫色晶体明显多于对照组，那就肯定是药物影响的，可能原因是干扰了琥珀酸脱氢酶的活力。
  
  解决办法就是换个染色方法如结晶紫染色检测存活情况。

• 911 (2012-4-03 17:25:46)

  各位大虾好，我最近在做MTT，观察药物作用肿瘤细胞后的细胞增殖和抑制情况，用的是改良的MTS法，步骤明显比MTT简单，当然质量控制应该比较好，490nm检测OD值，可是，做了几次下来，发现数值一般都在0.7-1.2之间，但是几乎所有实验组的数值都大于细胞对照组。很纳闷，不知道是什么原因？分别用药培养了24h,48h和72h，而且镜下观察细胞状态可以，接种的细胞在6-7*103，请明示，多谢！
  
  ——————————————
  
  请问简略操作步骤呢？

• zranqi_1 (2012-4-03 17:29:17)

  
  可以用CCK-8，灵敏度比MTT高。

• 2541 (2012-4-03 17:29:35)

  
  可能是MTS与药物反应。