[求助]转染时一加转染试剂(Opti-MEM I)或无血清培养基...

最新回复

• skytree (2012-4-05 15:26:39)

  
  好像没有碰到楼主说的这种情况，转染完了之后细胞会死，但不会那么快吧，感觉你说的就是几分钟的事情。我是用lipo转染的shRNA质粒，也有过在板子里养一天以后再转染的，细胞会死的多一些，但是不至于全死。滴加lipo、RNA混合液的时候，建议慢速一滴一滴的加，我是一边加，一边晃板子。毕竟lipo的毒性还是蛮大的。滴加li

• 33号 (2012-4-05 15:27:30)

  
  你这个情况也太夸张了，lipo2000确实有一定细胞毒性，但是也不至于一加细胞就死啊...
  
  你是转的A549细胞么？

• guagua (2012-4-05 15:27:51)

  
  是A549，而且是对照孔死得多，好像和lipo和sirna没有很大关系啊，是不是无血清培养基的原因啊

• 泡泡 (2012-4-05 15:28:13)

  
  个人认为是楼主的细胞有污染。生长速度变慢，转染后大批死亡都可能是因为细胞有污染使的细胞状态不好

• qqq111 (2012-4-05 15:28:34)

  
  今天做了试验纵欲找到原因了：就是***作时把孔的液体吸的很干净，我12孔一个一个吸，时间长了，而且超镜台是垂直风，一下把我前面的孔吹干了，加无血清后马上细胞飘起或死亡
  而我试验的没有吸的很干的孔，细胞一点也没事
  哎……终于解决了
  谢谢围观

• 阿司匹林 (2012-4-05 15:28:55)

  
  1.我也做过48小时后转染的情况，没见什么影响。
  2.我的细胞转染后也死去很多，我考虑为转染的目的基因本来就是一种抑制细胞生长的基因，这个可能影响转染后细胞的成活率。

• qqq111 (2012-4-05 15:29:15)

  
  问一下楼上是做sirna吗
  那阴性对照组死的怎么样啊？