[求助]关于细胞上清液一氧化氮(NO)检测的疑问

最新回复

• 831226 (2012-4-09 14:05:22)

  
  你的细胞经过诱导了吗，没有经过诱导是检测不出来的。

• yapuyapu (2012-4-09 14:05:42)

  
  你好！不过，在正常情况下，内皮细胞不是也产生NO吗？我的设想是在给予药物刺激后NO的生成反倒减少，想把没有药物刺激组作为对照！

• 00无名指00 (2012-4-09 14:06:00)

  我也用这个试剂盒，测出来浓度很低，很可能是他们试剂的问题，我准备投诉。
  楼主如怀疑是试剂问题的话，一起投诉吧。

• bananapeople (2012-4-09 14:06:39)

  我还给他们发过信，他们说24h后回复，结果等了将近一个月没答复。我实在气不过又给他们去信，他们说之前给我发过，但是我的邮箱空着啊，不过这次很快回复了，但是按照他的建议依然没有结果。。。费解。。。无语。。。

• 131415 (2012-4-09 14:06:59)

  不能测胞内的吗？因为细胞数量本来就少的话，那分泌到上清也就是胞外的可能就更少了。测胞内的，再用考马斯亮兰对蛋白进行定量，相除后，那就是测出来的是细胞单位蛋白的NO的量，这样更准确吧

• bananapeople (2012-4-09 14:07:58)

  
  那具体怎么操作啊，楼上用这个试剂果真测出来了吗？我这里不能超声降解细胞，只能冻融或是裂解液。冻融效果不好，裂解液那就稀释啦，浓度不更小了吗？请教一下yaonacp怎么处理以上问题的，谢谢！

• 101010 (2012-4-09 14:33:57)

  
  所有的实验设计必须要有文献支持，如果你查不到相关报道的话，基本上是做不出来的。

• ha111 (2012-4-09 14:34:59)

  
  我是加的裂解液，测的酶活，像SOD，GPX等等，测的细胞内的，在酶标仪上读的数据。但是我没有测NO，所以不敢保证能不能测出来。

• bananapeople (2012-4-09 14:35:23)

  这个是有文献支持的，不过具体测试方法不同。目前的实验条件用它的方法不太可能实现，所以只能用自己的方法！

• zhezhe (2012-4-09 14:35:45)

  
  楼主用的试剂盒是用酶还原法的吗？

• langlang (2012-4-09 14:36:10)

  
  我也用过碧云天的检测NO的试剂盒，但是检测到的浓度比文献报道的要低很多，怀疑是试剂盒不太好，现在买了sigma的粉末准备自己配griess reagents，再看看结果吧。

• pengke1983 (2012-4-09 14:37:57)

  
  内皮细胞的NO产生量很低，所以你测不出来。。。要用荧光标记检测，或者微电极检测。我们用的荧光标记
  
  巨噬细胞活化后的NO可以用griess法测出
  
  碧云天的试剂盒测组织还可以

• 2541 (2012-4-09 14:38:38)

  
  大家普遍都觉得碧云天的这个试剂盒有问题么，我正要准备做内皮的NO测定，具体的文献支持，同志有谁有比较成熟的啊，介绍一下！谢谢啦

• xevin (2012-4-09 14:39:22)

  你的细胞经过诱导了吗，没有经过诱导是检测不出来的。
  
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  您好：
  我在论坛上看到了您发了这个帖子，想请教您一下，如果我用干扰素诱导巨噬细胞的话，可不可以买临床上人用的干扰素啊，因为感觉这个东西如果从sigma买细胞培养级别的很贵啊！
  我做这个实验很久了，一直没有突破，希望您能多多指教！
  不胜感激！