[求助]MTT，加入DMSO之后的颜色

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标题:[求助]MTT，加入DMSO之后的颜色

bs4665[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位大侠，我做的是细胞增殖实验，为什么加入DMSO之后是紫红色？加入MTT孵育4小时后，孔底看见团块状的紫（黑色）色？有些孔有，有一些孔没有沉淀，加入DMSO之后未溶解
请问：加入MTT之后的沉淀是什么样子的？加入DMSO之后应该是什么颜色？紫色说明什么问题？非常感谢！！

caihong[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 bs4665 于 2012-4-9 19:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教各位大侠，我做的是细胞增殖实验，为什么加入DMSO之后是紫红色？加入MTT孵育4小时后，孔底看见团块状的紫（黑色）色？有些孔有，有一些孔没有沉淀，加入DMSO之后未溶解
请问：加入MTT之后的沉淀是什么样子的？加入DMSO之后应该是什 ...

加入后泛黄

bs4665[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

刚加入时基本泛淡黄色。

完全溶解后，颜色由紫黑到蛋黄按细胞代谢产生的甲那啥的量的多少分布。

qhyu[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用无血清培养基稀释的MTT溶液，整个颜色是浅橙红色，慢慢的会变淡，可以看到下面蓝紫色的结晶，结晶有点像小冰晶那样，加DMSO后变明显的紫色，也许下面深上面浅，再慢慢摇匀就可以测OD了。

nn255[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

也就是说紫色也是正常的？但是为什么检测那个老师说，如果是紫色，那就不应该用490的波长测OD，说是颜色不对？

3648755[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

也就是说紫色也是正常的？但是为什么检测那个老师说，如果是紫色，那就不应该用490的波长测OD，说是颜色不对？

____________________________________________________________________

紫色本来就是正常的颜色呀，你的结晶是蓝紫色，溶解后显紫色怎么不正常呀？

nn255[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可是为什么老师说用490的波长不对呢？
不好意思，我想再问一下，上次490nm测得调零孔OD为0.015-0.017，标本中最大的OD值0.127，大部分都是在0.020-0.025，请问这个有意义吗？应该怎样看OD的值有没有意义啊？

duoduo[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

OD值一般在0.1至0.9之间更接近其线性范围！加入MTT之后培养皿底部形成的是紫色沉淀，加入DMSO后将沉淀溶解，也是紫色的，我们一般在570nm测OD！个人感觉你测得的OD值有点太低了，不在其标准曲线的线性范围内，你可以通过多接种一些细胞或者溶解沉淀时少加一些DMSO来解决OD值太低的问题

duoduo[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你测量的OD值太低了，和空白对照都差不多了，估计你的细胞很少，或者你加的DMSO太多了

bs4665[使用道具]
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发表于 2012-4-9 19:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问DMSO 不都是吸去培养基后直接加150UL吗？这个量的多少和OD值有关系吗？而调零孔也只有0.015而已耶！头疼！！

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