[求助]大家帮忙看下这个有没有凋亡哦？

最新回复

• langlang (2012-4-13 13:16:18)

  
  第一张和第二张都是空白，两个视野的。

  
  79036878.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:16:35)

  
  下面的都是给药的

  
  81920228.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:16:52)

  
  化合物1

  
  79114129.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:17:11)

  
  化合物2

  
  39330456.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:17:28)

  
  化合物3

  
  76188157.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:17:44)

  化合物4

  
  92651581.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:18:02)

  
  化合物5

  
  65961135.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:18:31)

  
  化合物6

  
  68136457.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:19:23)

  
  化合物7

  
  60662497.snap.jpg

• 66小飞侠 (2012-4-13 13:19:43)

  
  你的图片的放大倍数有点大了，因为一个视野不到50个细胞，数量不够，仅靠这两张照片会有很大的误差；另外，照片的亮度有点偏强，部分掩盖了效果，现在只能看是否有很小很亮呈固缩的核形态。
  
  化合物1的第二张图：可能是你故意拍细胞少的地方或者是药物的作用使细胞脱落了导致数量减少；
  化合物3可见明显的核固缩，估计有促凋亡作用；4也有类似的现象；
  化合物5虽然核形态有多种形状，但固缩的核不多，且细胞数目较多；
  化合物6可能有一定的凋亡细胞，但荧光偏强了一点；
  化合物7的没有拍好，无法分析。

• langlang (2012-4-13 13:20:10)

  你的图片的放大倍数有点大了，因为一个视野不到50个细胞，数量不够，仅靠这两张照片会有很大的误差；另外，照片的亮度有点偏强，部分掩盖了效果，现在只能看是否有很小很亮呈固缩的核形态。
  
  化合物1的第二张图：可能是你故意拍细胞少的地方或者是药物的作用使细胞脱落了导致数量减少；
  化合物3可见明显的核固缩，估计有促凋亡作用；4也有类似的现象；
  化合物5虽然核形态有多种形状，但固缩的核不多，且细胞数目较多；
  化合物6可能有一定的凋亡细胞，但荧光偏强了一点；
  化合物7的没有拍好，无法分析。
  
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  谢谢你的指导。我下次用低倍镜来观察。是因为每次给药后都有大量的细胞脱落了，所以细胞的数量很少哦。我想问一下“很小很亮呈固缩的核形态”是什么样的啊？hoechst33342是不是还可以染凋亡小体啊，我的图片里是不是都看不到凋亡小体啊？

• 66小飞侠 (2012-4-13 13:20:40)

  
  至于细胞脱落，如果你有倒置荧光显微镜的话，你直接把细胞种在96孔板或者48孔板中培养、加药，加入Hoechst33258观察拍照就行了，不用爬片培养，这样可以减少细胞的脱落；
  
  或者你可以在培养皿中预先用明胶或多聚赖氨酸包被一下增强细胞的贴壁能力；
  
  Hoechst是染DNA的，所以凋亡小体是可以看到的，就是固缩的核后来被降解成几个体积较小的结构，在你的化合你6图片中的中间和偏右下向限的两个凋亡细胞就象是凋亡小体。
  
  拍照的关键你要把背景控制的比较低，这样才能有较好的信噪比。

• langlang (2012-4-13 13:21:06)

  至于细胞脱落，如果你有倒置荧光显微镜的话，你直接把细胞种在96孔板或者48孔板中培养、加药，加入Hoechst33258观察拍照就行了，不用爬片培养，这样可以减少细胞的脱落；
  
  或者你可以在培养皿中预先用明胶或多聚赖氨酸包被一下增强细胞的贴壁能力；
  
  Hoechst是染DNA的，所以凋亡小体是可以看到的，就是固缩的核后来被降解成几个体积较小的结构，在你的化合你6图片中的中间和偏右下向限的两个凋亡细胞就象是凋亡小体。
  
  拍照的关键你要把背景控制的比较低，这样才能有较好的信噪比。
  
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  请问一下，如果直接在96孔板或者48孔板中培养、加药，加入Hoechst33324后需要将液体弃去后，再用PBS洗涤后再观察还是直接观察啊？我们用的就是倒置荧光显微镜，但那个是用照相机照相的，每次拍的不怎么清晰。连接电脑的那台，只能放置玻片哦。

• 66小飞侠 (2012-4-13 13:21:26)

  
  倒置荧光显微镜接相机只要你会用相机，拍出来的效果也是可以的。
  
  如果说是倒置的，只是加了Hoechst的话，不用洗，也不用将液体弃去，直接拍就是了，前提是要保证背景比较干净。
  
  而且Hoechst可以拍活细胞，你可以两天后再拍都没有问题。

• langlang (2012-4-13 13:21:51)

  这个事用10倍镜照的
  化合物1

  
  15774852.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:22:08)

  
  化合物1 20倍镜

  
  30481601.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:22:33)

  
  化合物2 10倍镜

  
  57487258.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:22:56)

  
  化合物3 10倍镜

  
  74962173.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:23:16)

  
  化合物3 20倍镜

  
  48305665.snap.jpg

• langlang (2012-4-13 13:23:37)

  
  化合物3 20倍镜

  
  76974508.snap.jpg