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[求助]流式测凋亡，没有凋亡，怎么办？
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大家好：
如题。我肉眼观察，对照组和干预组有明显区别。干预组细胞数目减少。但是上机后发现，都只有死亡出现，但都没有凋亡。我测试了干预1小时，和24小时，都没有凋亡。干预的药物浓度也不同，但都是没有凋亡。请问我该怎么办？我都研三了。别人都发表文章了。我实验还没搞完，请问怎么办啊？
求求大家了！！
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最新回复
101010 (2012-4-16 12:30:58)
郁闷，这几天看到几篇这样的帖子了。。。。细胞死了就一定是凋亡么？
你有其他证据证明是凋亡么？如果任何证据都没有，仅仅是细胞死了，为什么就认定是凋亡呢？
ladyhuahua (2012-4-16 12:31:37)
同意楼上的意见。
我想这个问题，你可以先用燃料如hoechest/PI染一下，这种方法比较简单，显微镜看看，就可以了。如果有凋亡发生，再上流式也不迟，毕竟流式检测步骤要多谢。
dotaaa (2012-4-16 12:32:19)
woshituzhu (2012-4-16 12:33:05)
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这怎么能是期望的呢，做出什么就是什么啊
将PI单染和FITC单染的细胞在染色之前用沸水煮个一分钟试试，用这两个样品做参照来调节流式的参数。
dotaaa (2012-4-16 12:33:39)
楼上的朋友谢谢了。。你这做法根据是什么啊
vvmmoy (2012-4-16 12:34:52)
个人认为是Annexin没有染上，下次加大Annexin的浓度或者换个试剂盒用用。如果Annexin染上了，那么在PI单阳性区的细胞群就会被拉到右上象限去，那样就代表死亡细胞了。
xueyouzhang (2012-4-16 12:35:13)
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我们也是做了好几次多没有做出来，后来别人告诉了我们这个小技巧，
沸水煮一下，会造成磷脂酰丝氨酸的外翻，正好相当于凋亡所造成的磷脂酰丝氨酸外翻
abc816 (2012-4-16 12:35:41)
楼上的方法不错，我也正有同样的问题，别的方法能看到凋亡，唯独流式一直测不出来
2541 (2012-4-16 12:36:00)
能做出细胞凋亡的就是牛人，呵呵！
DDD (2012-4-16 12:36:49)
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认同这位兄弟的说法，应该是ANNEXINＶ没有染上，首先要排除试剂的原因或是加试剂过程中有没有加到试剂（或试剂加前没有混匀），另外要考虑的是体系中是否存在钙离子螯合剂，如EDTA等！
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