[求助]有培养过HL-60细胞的朋友吗？帮我看看这些细胞

最新回复

• 月牙牙 (2012-4-17 12:32:56)

  在贴一张

  
  73454483.jpg

• 月牙牙 (2012-4-17 12:33:39)

  
  还有这个

  
  48204373.jpg

• bananapeople (2012-4-17 12:34:03)

  
  HL-60细胞一般长的蛮快的，也很好养。1640+10%FBS既可。
  你说的点点是那些大点点吗？
  不像是污染，污染一般为沙粒装，在高倍镜下也会游动。
  
  感觉是培养基中的沉淀。或滴管干烤后沾的一些杂质。
  
  检查下培养基里有没有一些小沉淀，有时候血清放久了也有。
  如排除污染后，问题一般不大。

• 月牙牙 (2012-4-17 12:34:30)

  
  我是用的1640+10%FBS样的啊！可是长了一个星期都还没有长好
  而且背景还有那么些点点， 动倒也不动， 血清应该没问题啊 ！ 我同时养的HELA都没见有啊！细胞的形态不知道正常不？下面还有一张图

  
  57111990.jpg

• bananapeople (2012-4-17 12:34:57)

  
  一个星期没长好？不管是否污染，我觉得现在要做的就是，再找你同学弄瓶细胞。

• 月牙牙 (2012-4-17 12:35:26)

  
  哦 好的 谢谢，HL-60一般多久能长满啊？

• nn255 (2012-4-17 12:35:59)

  我从公司买的HL-60细胞株 总是长不好 前两次传几代就成黑点了培养液好多天不变黄 这一次3天就出先细胞聚团融合的现象 我想请教一下各位大虾 你们的细胞株来源是？

• 小野花 (2012-4-17 12:36:30)

  
  我也养HL-60细胞，复苏几次都不成功（-80度冰箱保存一年多了，没办法，没有其他细胞来源了），好着急啊，有没有哪位可以赠送一瓶，不胜感激！

• TAT (2012-4-17 12:36:52)

  细胞状态不好，黑点好像是细胞碎片，状态不好的时候就有这些东东

• 小野花 (2012-4-17 12:37:38)

  
  我也同意是细胞碎片，我复苏的时候也遇到这个问题

• langlang (2012-4-17 12:38:09)

  
  用IMDM+10%FBS

• 小野花 (2012-4-17 12:38:30)

  
  HL-60是用1640+10%FBS 养的

• 831226 (2012-4-17 12:38:56)

  
  我也需要培养这个细胞，不知道这个细胞是不是很难养呢？
  
  一般来说，悬浮细胞要怎么去除死细胞呢？如果离心的话，应该死细胞也会沉淀吧？！

• vera+ (2012-4-17 12:39:18)

  
  养了3年这个细胞了
  1.你这图上的细胞是活的么？活的应该是圆的吧？
  2.你这细胞密度也太低了吧？细胞怎么能对数生长呢？
  3.其他的小黑点肯定是细胞碎片，离心的时候转速控制到700rpm，3min。用1640洗一遍。
  4.我们做过对比，国产血清养状态就是不好，细胞里面容易出现小泡，然后状态就慢慢不好了。实验室要是有钱就买进口血清，Gibco或Hyclone都可以

• wmp1234 (2012-4-17 12:39:46)

  我也养了好长时间这个细胞了，感觉你的细胞是死了吧，都是碎片了，正常细胞应该是圆形的，你现在还有没有这个细胞啊？能不能给我一瓶啊？我的状态倒是很好，就是传代次数太多了，我要转染，得用传代次数少的，又没有冻存的了

• xue258 (2012-4-17 12:40:16)

  我也需要培养这个细胞，不知道这个细胞是不是很难养呢？
  
  一般来说，悬浮细胞要怎么去除死细胞呢？？？？？如果离心的话，应该死细胞也会沉淀吧？？！
  
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  我也在养悬浮细胞。我的理解是换液离心一般都不能去除细胞碎片，他们主要是依靠活细胞利用而消失。细胞状态好，一般背景就很干净，碎片很少。但是，如果细胞碎片增多，状态走下坡路，很难纠正过来。

• chuntian1983 (2012-4-17 12:40:53)

  
  HL-60应该是相对比较好养的细胞了，我们实验室就是师弟师妹练手用的。从你的图片上看，你的细胞明显的是老了，基本上没有细胞全是碎片。我曾经试着不同转速离心来进行优化，结果折腾了两周都没有效果。

• greenbee (2012-4-17 12:41:18)

  你好，你那里还有hl60细胞么，能否给我一瓶呢？

• caihong (2012-4-17 12:41:35)

  
  HL-60细胞蛮好养的，我已经养了快一年了。国产四季清的血清就很好的，养的状态也蛮好，不必花太昂贵的钱去买血清，因为这个细胞长的很快，天天得换液，消耗的血清也很多。
  细胞碎片可以通过离心去除的。平时养细胞时，一般离心转数少点，800rpm ,5min就够了，若细胞太多3min也可以，以免细胞机械性损伤，吹打时也轻点。总体来说这个细胞很好养

• dotaaa (2012-4-17 12:42:31)

  
  这细胞我正养着，还可以，属于好养一类，就是要多给些爱心，呵呵。。。。