[求助]给HepG2.215细胞上药多少天做MTT?

最新回复

• xevin (2012-4-17 14:04:33)

  
  不4要到第8天药物作用才能在细胞生长数量上表现出来吗？
  
  如果你的药物2天起效，那啥你9可以2天加MTT呗。

• zwsyrt (2012-4-17 14:04:51)

  估计这个跟药物有关系吧，我们实验室做个这个细胞的MTT,用药一个小时就OK了！

• mamamiya (2012-4-17 14:05:11)

  
  预先的工作要检查好，比如药物的稳定性
  一般的肿瘤细胞72小时足够了，到8天的话存在几个问题（也可能是我不清楚的地方）：一是你的药物的目的是什么？是杀细胞还是分化或者其他指标的抑制或增强？如果是杀细胞，有效果的话72小时足够了。二是要是到第8天细胞还没长满，开始加的细胞非常非常少吧？在密度非常低的情况下，细胞的克隆能力成为药物作用的主要靶点而不是增殖能力，如果细胞非常少，不太适合找到明确的结论。三是MTT比较传统的说法是OD值在0.8以下是线性，我也做过，细胞太多的话，MTT的值和细胞数不成正比的，所以会影响结果。

• ququer787 (2012-4-17 14:06:07)

  预先的工作要检查好，比如药物的稳定性
  一般的肿瘤细胞72小时足够了，到8天的话存在几个问题（也可能是我不清楚的地方）：一是你的药物的目的是什么？是杀细胞还是分化或者其他指标的抑制或增强？如果是杀细胞，有效果的话72小时足够了。二是要是到第8天细胞还没长满，开始加的细胞非常非常少吧？在密度非常低的情况下，细胞的克隆能力成为药物作用的主要靶点而不是增殖能力，如果细胞非常少，不太适合找到明确的结论。三是MTT比较传统的说法是OD值在0.8以下是线性，我也做过，细胞太多的话，MTT的值和细胞数不成正比的，所以会影响结果。
  
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  我想了下，我们做这种细胞的目的是看药物对细胞分泌s抗原和e抗原的影响，做抗原的分泌一般是需要把细胞培养8天是吧，所以做MTT也应该跟后面的实验用药时间保持一致，是这样吗？

• windy+++ (2012-4-17 14:06:23)

  
  那既然是药物对细胞分泌的影响，你做的MTT是想检测什么呢？检测细胞数量么？是否是希望排除药物对细胞本身数量的影响？

• ququer787 (2012-4-17 14:06:47)

  那既然是药物对细胞分泌的影响，你做的MTT是想检测什么呢？检测细胞数量么？是否是希望排除药物对细胞本身数量的影响？
  
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  我们在给细胞上药前都要确定给药浓度以保证药物对细胞无毒，做MTT就是为了确定给药的无毒浓度范围，这是通过测吸光值来判断的

• yapuyapu (2012-4-17 14:07:04)

  
  能问下楼主是哪的啊，能问你要点这细胞吗，我的这种细胞在搬家后都复苏不活了

• yapuyapu (2012-4-17 14:08:12)

  
  当然也可用其他细胞交换，我有HUVEC,3T3-L1

• ququer787 (2012-4-17 14:08:54)

  能问下楼主是哪的啊，能问你要点这细胞吗，我的这种细胞在搬家后都复苏不活了
  
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  你是哪里的呢？请问下，你的这个细胞的培养基是怎么配的啊？

• guagua (2012-4-17 14:29:58)

  
  我是南京的，培养基是买的啊，粉末的