[求助]transwell侵袭实验

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我最近正准备做侵袭实验,了解了群里的一些帖子,但是对基质胶的铺法还不是很清楚,我看的大多都是把胶按1:8稀释,但是有个老师告诉我说保证每孔7-8微克就行,1:8太浓了,影响细胞的穿过,各位高手给指点一下,这个胶的浓度是根据什么确定的?是不是细胞不一样浓度也不一样啊?马上要过年了,想一次性的尽快做完,各位帮帮忙吧!
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最新回复

  • 小鱼鱼 (2012-4-18 17:17:44)


    你用的是transwell小室吗?从哪个公司买的?价格?可以重复利用吗?
  • abc816 (2012-4-18 17:18:01)


    请问什么是transwell以及transwell侵袭实验?不好意思,我是新手
  • eric930 (2012-4-18 17:22:09)


    1.transwell:
    trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍,可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters),也可认为是一种有通透性的支架(permeable supports)。更准确地说,Transwell应该是一种实验技术,这项技术的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber,Transwell insert),其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,不同厂家对Transwell会有不同的命名,而不同型号也可有不同形状,不同大小,根据实验需要有不同选择。
    2.肿瘤细胞侵袭模型

    用于研究肿瘤细胞侵袭能力的肿瘤细胞侵袭模型有如下几种(引自司徒镇强《细胞培养》):
    2.1 体内癌细胞侵袭模型
    2.1.1 皮下移植侵袭模型
    2.1.2 肌肉内移植侵袭模型
    2.1.3 腹腔内移植侵袭模型
    2.1.4 小鼠肾包膜下移植侵袭模型
    2.1.5 鼠睾丸包膜下移植侵袭模型
    2.1.6 小鼠耳廓皮下移植侵袭模型
    2.1.7 鼠爪垫皮下移植侵袭模型
    2.1.8 视网内界膜侵袭模型
    2.2 体外癌细胞侵袭模型
    2.2.1 体外静止器官培养法
    2.2.1.1 半固体培养基单细胞器官培养法
    2.2.1.2 液体培养基单细胞器官培养法
    2.2.2 半体外半体内器官培养法
    2.2.3 单层细胞器官培养法
    2.2.4 瘤细胞球体器官培养法
    2.2.4.1 静止球体器官培养法
    2.2.4.2 旋转摇动球体器官培养法
    2.2.5 单层细胞侵袭实验模型
    2.2.6 Transwell侵袭小室测定法
    Transwell侵袭只是其中的一种!
    楼上还有不懂的可以到这个链接看看:
    cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=7506372&sty=1&tpg=1&age=0')
  • junhun (2012-4-18 17:22:26)


    我最近刚做了几次transwell侵袭实验,用的胶是按1:6的比例稀释的,效果不错啊!
  • 831226 (2012-4-18 17:23:45)


    问一下,我用的是corning公司的transwell,基质胶是已经就铺好的还是要自己买了去配呢?
  • 小鱼鱼 (2012-4-18 17:24:10)


    可以用Boyden小室代替!
  • ladyhuahua (2012-4-18 17:25:16)


    我用的也是corning公司的transwell,要看你买的规格了,不过以前听说corning公司的transwell都不带胶,带胶的价格肯定也比较贵!你自己判断就好了,呵呵
  • 8princess8 (2012-4-18 17:25:48)


    我刚买的,corning costar 的,3422,
    4块板,每块24孔板,有12个transwell。价格1500。
    没有胶,胶要自己铺。我买的是BD的matrigel,5ml,1500
  • TAT (2012-4-18 17:26:14)


    millicell的趋化小室有没有基质胶啊?
  • is2011 (2012-4-18 17:26:35)


    胶的作用是什么 ?所有的侵袭试验都需要胶吗?可以不用胶不?
  • xevin (2012-4-18 17:26:54)


    我是用的1:20的比例,效果一样好啊!
  • newway (2012-4-18 17:27:16)

    请问做Transwell 的群友,你们有没有多的matrigel胶转让呀,谢谢
  • loli (2012-4-18 17:27:39)

    请问一下,风干大约需要多长时间,还有就是风干的时候,要不要打开培养板的盖子,如何判断matrigel已经铺好。
  • 大白菜 (2012-4-18 17:29:29)

    可以放到超净台紫外照过夜就可以了,要打开盖子的,铺胶时要放冰上,水平摇匀
  • loli (2012-4-18 17:29:52)


    谢谢 ,可是matrigel中含有多种蛋白,紫外线照射会破坏其成分,这样岂不是会影响实验结果的可靠性。还望指教,谢谢。
  • 大白菜 (2012-4-18 17:30:27)

    我最近在网上查了很多corning costar 的Transwell培养板信息,我需要用到 3401的,也是4块板,每块12孔板,0.4um,聚碳酸酯膜,报价是1900,还不带运费,没有铺胶。请问你是在哪个公司买的?挺便宜的,做个参考,谢谢!
  • guagua (2012-4-18 17:30:47)

    价格应该是一样的,孔径不决定价格。但是孔大的话可能要贵一点,因为膜面积比较大。如果你用的是12孔板,价格会高一点的。
    我在武汉,如果你也是附近地区的,可以联系我。我帮你联系公司。但是不知道现在还有没有。你用0.4um的,做共培养么?
  • 大白菜 (2012-4-18 17:31:20)

    谢谢!是用来养Caco-2细胞的,我在郑州,这两天咨询了好几家公司,华粤行的报价最低,1500,但是没有现货,得订货,大概四五十天能到,北京东胜泰博有现货,是1800,老板嫌贵,说也不是说马上就用,主张订货,想了解下你们那的情况,一个是价格一个是时间,谢谢!
  • 大白菜 (2012-4-18 17:31:49)


    请问大家:PC和PET有多大差别?可以用后者取代前者吗?
    我是要用Transwell 聚碳酸酯膜 0.4um 来养caco-2细胞,先谢啦!
  • cj_mondy (2012-4-18 17:32:22)


    其实两者区别也不大 看表格吧


    47202603.jpg

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