[求助]细胞污染，不知道是什么种类的污染，请看看，谢谢！

最新回复

• tuuu2 (2012-4-29 09:36:53)

  
  请求帮助啊，谢谢，到底是什么啊

  
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• tuuu2 (2012-4-29 09:37:14)

  急啊

  
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• junhun (2012-4-29 09:37:33)

  
  我养的成纤维细胞最近也出现这种状况，细胞生长速度变慢，培养盘中出现很多点点状的物质，细胞看起来很脏，点点在高倍镜下看也没有动，培养基没有变黄也没有变浑浊。同问，这大概是什么原因？

• fqswdzd (2012-4-29 09:38:13)

  
  这种情况我做转染的时候也碰到过
  如果继续培养细胞可能会越来越少
  那些点点是不是污染不好说，可能是细胞状态不好，细胞凋亡碎片。
  可以将细胞传代换个培养环境试试，细胞数量不够的话用小一点的细胞培养皿，换点好的新鲜的培养基，我用这种方法救活过几个细胞克隆，现在细胞状态很好了，就没有那些点点了。

• greenbee (2012-4-29 09:38:31)

  前一段时间我也遇到同样的情况，很多黑色物质，铺满细胞间质，培养基澄清，镜下看不到移动，用革兰氏染色后镜下观察，几多的细胞碎片，所以我认为可能是某些原因导致的细胞极具死亡，细胞崩解。继续培养的话只会越来越少，建议把细胞丢掉，重新复苏或购买其他厂家的细胞。

• 49888 (2012-4-29 09:38:50)

  请问这是传说的真菌感染吗？

• hold住 (2012-4-29 09:39:09)

  
  我养的是内皮祖细胞，以前也是出现过这种状况，加入双抗后没有明显的好转。细胞生长增殖速度变慢，培养瓶中出现黑色，片状点，细胞看起来很郁闷。现在好了！建议你换个培养箱，你现在的培养箱中是不是有同仁在样杆菌或者是腺病毒和肿瘤细胞啊！！我以前就是把我的细胞和他们在同一个培养箱里的，感觉总是污染，很郁闷就向科研中心的老师反映，将培养的物质分门别类，现在好多了，没有出现这种很郁闷的情形了！！建议你可以试一下，也许会对你有所帮助！

• greenbee (2012-4-29 09:39:30)

  
  我养的就是肿瘤细胞啊
  不过经过这几天处理（怀疑真菌，订的两性霉素没到），我似乎摸到了一些道道，与大家分享
  
  1.消化吹打，（轻点，因为发现这些东西贴壁比细胞牢固啊）
  2.低速离心（600rpm，5min）
  3.重新装新瓶子
  4.5-8个小时（具体不清，这是参考我自己的）后，细胞大多贴壁，而这些玩意儿还大多漂浮，赶紧PBS冲掉啊
  
  貌似好点了，详情将继续向大家汇报！

• woshituzhu (2012-4-29 09:39:50)

  是不是黑胶虫污染啊？

• woshituzhu (2012-4-29 09:40:10)

  
  污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视，防止污染，否则会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。细胞培养中常见的生物污染类型有7种，分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下：
  
  1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。
  
  2、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。
  
  3、黑胶虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。
  
  4、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
  
  5、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。
  
  6、 病毒：组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题
  
  7、非同种细胞污染：即是细胞交叉污染，由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世界上已有几十种细胞都被 HeLa细胞所污染，致使许多实验宣告无效。非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生，大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致。

• zhezhe (2012-4-29 09:40:28)

  应该是真菌，细胞培养液不变浑浊符合真菌污染的特点，而且随着培养时间的延长细胞要么不生长，要么会变少。但又不像一般真菌那样有明显的菌丝，据有经验人传说是酵母，镜下不运动符合酵母的特点，但我也不确定。