[求助]请教细胞培养时上清中细沙样的颗粒是什么？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2012-4-29 13:10 作者: junhun 来源: 分析测试百科网

各位大虾，我一直在养人胚肺成纤维二倍体细胞，但是细胞培养基上清中总是有细沙样的东东，而且是刚冻存复苏的会好些，养几天一传代就出现了，从别人那里拿了新细胞，也用了与他们一样的血清，刚拿来好好的，养几天传代也变成这样，不像是细菌污染，因为它不动，如果不经离心会越传越多，很影响细胞生长，那到底是什么东西呢？如何去除它，这个问题困扰了我很久，一直没法解决，另外我们的细胞培养箱使用的人比较多最少是七八个人，多时十三四个，有关系吗？***了！

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tianmei001 (2012-4-29 13:11:45)

高倍镜下也不动吗，是不是黑胶虫
一旦有了，很难去干净
严格上说，污染了的细胞要全部扔掉，培养箱彻底消毒
hyuu (2012-4-29 13:12:52)

我的细胞也出现过这样的问题，后来只能不停的换液，离心，消化，换了新的并指之后，能好一段时间，不管很快就又是老样子，真的是疯了，我到现在也没有能解决，不知道有谁知道该怎样解决呢？
qumm1985 (2012-4-29 13:13:37)

培养基是否清亮？如果混浊确信无疑是污染了。
尤其是你说冻存复苏就有，实际上以前保存的时候就是已经污染了的。
sunnyB (2012-4-29 13:13:56)

是污染，有可能是支原体衣原体，需要做的就是全部扔掉，把所有能消毒的东西都重新消一次，细胞重新复苏最早的批次。
wu11998866 (2012-4-29 13:14:15)

我的师姐也遇到类似的情况，后来没有办法，只得买了杀支原体的药，杀了一段时间之后，细胞就慢慢的正常了，不过，那个抗支原体的药蛮贵的就是了。建议如果还有健康的细胞的话，就不要买，把污染的细胞全部处理掉，再把所有的东西换一下，再试一下。用药杀是下下策，没有办法而为之
笑弯了腰 (2012-4-29 13:15:15)

我做原代培养.每次细胞都出现类似情况而扔掉了，三个月一直这样,快被折磨死了.实验室消毒了也不行啊!各位有没有好办法急啊!!!
jujuba (2012-4-29 13:15:32)

这个东西好像是搞不掉的，代代相传，也不会影响细胞生长。。。培养液一切正常。。。应该是沉细胞间隙吧。。。感觉是细胞代谢有点问题。。。
lagua123 (2012-4-29 13:15:51)

我养的食管癌细胞也曾出现过细胞内和培养液中细砂样的东西，PBS可以冲洗掉，但两天后又出现，不影响细胞生长，起初以为是污染，但重新消毒培养用的器皿，过滤培养液，要同学的生长得正常的细胞后，细砂样物依然存在，后来血清升级，细砂杨物三天便消失，考虑是细胞营养不足产生的代谢物。
与大家分享个人养细胞的一些经历，愿养细胞的战友们试验顺利。
toy (2012-4-29 13:16:08)

我的那时候换了血清，把新生牛换为胎牛了，可是还是状态没有好转，最后只能看到细胞死掉，那时候同期培养的其他细胞都没有出现这样的问题，只有一个SKOV3细胞这样。而且那时候也重新消毒了实验环境和器具，还是这样…………