[求助]1640干粉培养液的配置问题请教？

最新回复

• greenbee (2012-5-08 10:49:07)

  
  回答第二个问题
  
  血清是在你调了酸碱度之后加入的！

• pengke1983 (2012-5-08 10:50:21)

  回答第二个问题
  
  血清是在你调了酸碱度之后加入的！
  
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  多谢，调节酸碱后定容到1L，然后按照9：1的比例加血清吗？呵呵，顺便延伸到第三个问题。

• dongdongqiang (2012-5-08 10:51:08)

  
  配制培养基前，先看包装上的使用说明，明确粉剂里加有的成分和没有加的成分，如果有条件，为使你的培养基缓冲能力更好些，你可以添加Hepes(2.66g/L)和丙酮酸钠(110mg/L)。
  1、按包装上的要求加入碳酸氢钠
  2、配制培养基时，先调节PH，后定容至1升，定容后进行无菌过滤，过滤的滤液分装，血清在使用前加入。
  3、含10％血清的培养基，按照培养液和血清9：1的比例加入，也就是说，如果过滤分装的培养基是90ml，那么加入10ml的血清，就为含10％血清的培养基了。

• pengke1983 (2012-5-08 10:52:07)

  
  再请教一下，DMEM培养基说明上是加入3.7g的碳酸氢钠，但这是在10%二氧化碳条件下的量，所以一般推荐加入1.5g，1640这个2g碳酸氢钠是否也是10%二氧化碳的培养条件下的添加量那？

• qhyu (2012-5-08 10:53:02)

  1640干粉培养基1L说明书上是加入2g碳酸氢钠，大家都是加多少？
  
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  呵呵，养了很久的细胞了。告诉你，照着说明加，没有关系的，因为最后你要调pH在7.2-7.4之间。我一般调到7.2，因为过滤后要涨零点二左右。

• qhyu (2012-5-08 10:55:44)

  配置好1升培养液后，调节pH到7.2是在加入血清前还是之后？
  
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  再加血清前调。

• qhyu (2012-5-08 10:56:37)

  如果是使用前加入血清，10%血清，是否是按照培养液和血清9：1的比例加入？
  
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  是的。

• qhyu (2012-5-08 10:57:15)

  再请教一下，DMEM培养基说明上是加入3.7g的碳酸氢钠，但这是在10%二氧化碳条件下的量，所以一般推荐加入1.5g，1640这个2g碳酸氢钠是否也是10%二氧化碳的培养条件下的添加量那？
  
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  还是回到了上一个问题上了。这个没有影响的。还有，告诉你，培养液缓冲能力很强，PH值不会差很多 的。有经验的人都不调PH，直接看颜色就知道行不行。

• tianmei001 (2012-5-08 10:59:40)

  问题1：1640干粉培养基1L说明书上是加入2g碳酸氢钠，大家都是加多少？
  问题2：配置好1升培养液后，调节pH到7.2是在加入血清前还是之后？
  问题3：如果是使用前加入血清，10%血清，是否是按照培养液和血清9：1的比例加入？
  问题一：可按照说明书加。有经验的老师会根据说明书给的量，参照假如以后培养基的颜色是否正而有所增减。
  问题二：加血清前加入。
  问题三：血清加入10%-20%之间即可，所以没那么严格。一般看盛培养基的瓶里大约有多少ml，然后加10%-20% 。一般加10%，也可适量增加到15%

• hold住 (2012-5-08 11:00:06)

  血清可以根据自己的习惯加入的。
  
  我们实验室都是用之前加入配置的。
  
  另外顺便问下战友 丙酮酸钠 一定要加吗？如果不加会对细胞有什么不好的影响吗?
  
  我们好像没有加哟！

• qhyu (2012-5-08 11:00:43)

  问题1：1640干粉培养基1L说明书上是加入2g碳酸氢钠，大家都是加多少？
  问题2：配置好1升培养液后，调节pH到7.2是在加入血清前还是之后？
  问题3：如果是使用前加入血清，10%血清，是否是按照培养液和血清9：1的比例加入？
  
  1. 加2克。
  2. 调完pH再加血清。
  3. 对啊，9：1。