[求助]培养基偏酸应该怎么处理

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• yychen (2012-5-09 16:45:11)

  
  不是很明白楼主的意思？是什么很酸？是你培养细胞的细胞培养瓶里面的培养基颜色黄 还是你剩下的培养基颜色黄呢？
  1、如果是你培养细胞的细胞培养瓶的培养基颜色很黄的话，你的细胞在呼吸运动啊，怎么可能不黄呢？你根据情况传代或者换液就可以了
  2、如果是你剩下的培养基很黄的话，如果细胞很皮实的话，继续用应该没问题的，细胞对酸性环境的耐受程度远大于对碱环境的耐受程度。如果你不放心的话，可以在细胞培养瓶里面用0.5%的NaOH进行调节，但是千万记住，量不宜多。还有一种方法就是用培养细胞的时候将盖子直接拧死，这样避免与外界CO2的接触，温度一升高，自然就碱了。
  祝您成功！

• lagua123 (2012-5-09 16:45:32)

  
  呵呵，楼主，一般来说，按你的说法，你的细胞应该是增殖很快的。如果细胞增殖较慢，而培养基变黄较为迅速，则在已排除污染的前提下，不排除培养基本身pH偏低的问题。
  我们一般在配完1640后， 都会用pH剂测一下培养基的pH，如果过于偏酸或是偏碱，就调一下再用，这样比较稳妥。

• fklo83 (2012-5-09 16:46:22)

  1640培养基已经过滤好了，培养细胞一天，发现培养基颜色变黄，分析原因应该是培养基偏酸。那么现在我们的培养基还可以继续用么，需要怎么处理？
  
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  要知道1640跟dmem不一样，1640里面的ph缓冲离子比较少，缓冲能力比较低，所以很容易出现发黄的情况，当然这跟细胞的生长速度也很有关系。lz你养的是什么细胞？倍增时间是多长？
  当然细胞在酸性环境里问题不会很大，因为体内本来就是偏酸性的。

• kulee (2012-5-09 18:49:32)

  
  偏酸可以用NaHCO3来调，偏碱可用Hepes来调

• hustwb (2012-5-09 18:52:16)

  
  弄明白了，就是培养基偏酸。

• ha111 (2012-5-09 19:10:56)

  弄明白了，就是培养基偏酸。
  
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  过滤完就偏酸，是吗？

• yychen (2012-5-09 19:11:18)

  
  我是新手，想请教一下，培养基是在加完血清之前还是之后调PH值啊？如果是在加完血清之后调，那还得再滤一下啊，如果是在加血清之前调，加完血清之后PH不变吗？

• caihong (2012-5-09 19:15:11)

  
  注意细胞培养加入的一切东西均得是保证无菌的。意思即为加之前必须是已经无菌过滤好的。

• hot_hot_hot (2012-5-09 19:15:35)

  弄明白了，就是培养基偏酸。
  
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  1640自己配的？还是买的？
  您说的偏酸是在过滤完后发现的，还是操作了几天后发现的？

• hot_hot_hot (2012-5-09 19:16:03)

  培养细胞一天，发现培养基颜色变黄，
  
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  对您的问题没有看明白。
  就是说，您的培养基颜色没有问题，但是您的培养瓶中的培养基的颜色在培养1天后变黄了，是吗？

• viviwang1987 (2012-5-09 19:16:31)

  “还有一种方法就是用培养细胞的时候将盖子直接拧死，这样避免与外界CO2的接触，温度一升高，自然就碱了。”
  
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  请问：不与外界接触，就没有新鲜的氧气了，这样对细胞不是不好吗？

• hustwb (2012-5-09 19:16:56)

  1640自己配的？还是买的？
  您说的偏酸是在过滤完后发现的，还是操作了几天后发现的？
  
  对您的问题没有看明白。
  就是说，您的培养基颜色没有问题，但是您的培养瓶中的培养基的颜色在培养1天后变黄了，是吗？
  
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  是的，操作了几天后发现的，培养瓶里的变黄，培养基颜色没有变化。谢谢你这么认真的看我的帖子，有时候自己一着急所以问题就没有表达清楚。
  现在我们用5.6%的碳酸氢钠调过了，一切正常。