[求助]细胞有点老怎么办

最新回复

• langlang (2012-5-15 10:46:45)

  
  应该没有 吧。
  切记细胞不能长的 太老，不然细胞状态会变差。影响实验结果。
  
  马上换新鲜培养液试试吧。

• orangecake (2012-5-15 10:48:48)

  昨天就看有点老了，赶紧换了液，今天看上去变化不大，这是刚复苏的细胞，每次复苏了都长得很慢，所以我都不知道现在是因为刚复苏的原因还是因为老了的原因，长的慢

• langlang (2012-5-15 10:50:03)

  
  估计细胞本来状态就不好的，有时间赶紧重新复苏吧，我们复苏细胞不会长的太慢的。不知楼主冻存细胞数目是否有点少。细胞少的话肯定会长的慢的。建议冻存加大细胞浓度。

• orangecake (2012-5-15 10:51:57)

  
  这是以前别人冻存的，大约一年了，-75，密度倒还行，反正复苏之后大致看了一下，约存活一般吧，

• langlang (2012-5-15 10:52:17)

  
  没有液氮罐吗？我们用液氮罐冻存细胞的。低温冰箱保存细胞时间好像不能很长的。

• langlang (2012-5-15 10:52:34)

  
  
  可能是冻存时间太长了的原因吧.

• shenkunjie (2012-5-15 10:53:04)

  
  HepG2是典型的疯长细胞，我养的时候，每天都要传代，烦的要死。
  象楼主这样，显然是细胞状态不好，严重影响了实验进程。
  建议如下：
  1. 换胎牛血清，刚复苏的细胞可将血请比例调到15%。
  2. 如培养基放置时间较长，测PH值，若不在范围内，不要用；若尚在范围内，补充谷氨酰胺。
  3. 按以上操作，如3日内仍无起色，立即丢弃，重新复苏，不要继续浪费时间和精力。
  4. 如果冻存的细胞密度比较小，则复苏用最小的培养瓶；或者一次多用几管细胞。
  5. 如果复苏以后都长不好，那可能是保种时状态就不好，或者是冻细胞出了问题，赶快找别的实验室要把，有钱就去ATCC买，保证疯长。

• langlang (2012-5-15 10:53:23)

  
  看来楼主细胞是在低温冰箱放置时间有点了吧。论坛的朋友说在低温冰箱放置最好不要超过4个月的。我们一直是在液氮罐冻存细胞的。

• KGZ564 (2012-5-15 10:53:49)

  
  请问老细胞什么样子啊？谢谢！

• orangecake (2012-5-15 10:54:28)

  
  我感觉我的有点老是因为细胞形态偏圆，伸展不开，细胞表面发黑，不是那种透亮的感觉，总之和生长状态好的时候差别较大，

• langlang (2012-5-15 10:55:10)

  
  细胞老了就不透亮了,死细胞增多,细胞轮廓清楚,细胞质比较明显.