[分享贴]原代肝星状细胞

最新回复

• 33号 (2012-5-19 13:25:06)

  我是前一段时间不断得到你帮助的小师妹，我想问一下，你也是用胶原酶和链霉蛋白酶分离的吧，不知你消化多长时间，到什么状态为止，我将肝脏剪下来以后，加入消化酶，将其剪碎，然后磁力搅拌30分钟，就可以了，总共也就一个小时，肝脏并未见等到液化状态，是不是消化不够，导致肝细胞大量存在？

• 33号 (2012-5-19 13:26:13)

  
  还有你能不能提供一张倒置显微镜的图片，我们这里没有相差显微镜，万分感谢，我还不知肝星状细胞形态呢，

• XYZQ (2012-5-19 13:26:56)

  
  染过什么色？

• huifeng0516 (2012-5-19 13:27:27)

  没有染色，那是背景的颜色，背景颜色很多种，还有紫色，是荧光显微镜滤片本身的颜色，当色，你也可以换成无色的滤片。

• huifeng0516 (2012-5-19 13:27:49)

  我还有用DNA I酶，上次已经发了密度梯度的方法与经验，你按照那去做，肯定末问题，纯化率90%以上。

• XYZQ (2012-5-19 13:28:09)

  没有染色，那是背景的颜色，背景颜色很多种，还有紫色，是荧光显微镜滤片本身的颜色，当色，你也可以换成无色的滤片。
  
  ————————————————————
  
  为什么用？
  脂滴看不大清楚了哦

• jkobn (2012-5-19 13:28:44)

  
  没做过，不太懂
  能不能给指出几个典型的。
  有没有更清晰一点的？

• huifeng0516 (2012-5-19 13:29:09)

  为什么用，觉得好看，我再给你发张紫色背景的，难道你没有用过荧光显微镜，或者高级的倒置相差显微镜嘛？有很多种滤片颜色，建议你到相关科室看看显微镜。而且肝星状细胞含有很多脂滴， 这张是在荧光显微镜下×400,也是48小时的。

  
  39974554.snap.jpg

• XYZQ (2012-5-19 13:29:59)

  哈哈，我们这很穷，只能用很普通的倒置显微镜看大鼠原代培养的大鼠肝星状细胞，包括细胞浆内的脂滴，呵呵！

• viviwang1987 (2012-5-19 13:30:24)

  楼主，俺有个小疑问，这细胞48小时就已经星形了，是不是活化了？
  不知道你用得什么品系大鼠，多大的。
  
  还有可否透露你在上海哪里做得（保密得话就算了）

• XYZQ (2012-5-19 13:31:09)

  
  48小时不会活化，活化大约在7-9天左右，我用的wistar大鼠，分离此种细胞时，一定要注意大鼠的体重问题，体重太大了，则脂肪组织太多，太轻了，此种细胞太少，所以选择重量合适的大鼠也是很重要的。

• XYZQ (2012-5-19 13:31:36)

  
  一般认为大鼠的第3、4天属于过渡期/“半”激活，7天已经活化了

• wu11998866 (2012-5-19 13:32:05)

  
  我也养大鼠肝星状细胞，想请教大家，星状细胞在培养过程中培养基PH值变化大吗，一般在什么条件在生长较好，我的细胞自从第一次换液后，培养基颜色基本没什么变化，也发现细胞在增殖，不过细胞密度不是太高，有次细胞密度太高了一个挨着一个，养了七八天了也没见培养基变酸，真是郁闷。

• mimili_901 (2012-5-19 13:32:53)

  大鼠体重以多少为好，我刚买的时候，体重300克左右，现在约400克左右，现在实验作的不断熟练，还是结果不理想，正在等待中。看文献说，体重较轻的，可以经过维生素A处理，不止如何处理，只有这个因素未处理过了，如果结果还不好，我真的没招了。