[求助]SGC-7901转染问题

字体: 小中大 | 打印发表于: 2012-5-21 11:45 作者: zzzz 来源: 分析测试百科网

我最近在养SGC-7901细胞，遇到了一点问题，想请教一下各位。
我的细胞在两周前分别转染了干涉质粒和超表达质粒，设了空转脂质体的对照以及未处理的对照，干涉组用G418筛选，超表达组用嘌呤霉素筛选，已经筛两周多了。
细胞转染前状态很好，转染后筛药前，死掉一半，第二天加药，细胞状态开始变差，有许多沉淀产生，换液时可以洗去这些杂质，第二天又反复，每次加药换液都要冲洗，细胞生长很缓慢，内有空泡。
已经过了两周了，不知道怎么办才好啊，恳请相助，不胜感激！

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[求助]SGC-7901转染问题

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zzzz (2012-5-21 12:40:22)

再附一张另一种质粒转染的细胞

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zzzz (2012-5-21 12:40:42)

这张是7901细胞加脂质体作对照后，加的G418

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zzzz (2012-5-21 12:41:00)

这张是7901加了脂质体，加的嘌呤霉素

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zzzz (2012-5-21 12:41:18)

这张是7901细胞不加任何东西做对照，加的G418

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c86v (2012-5-21 12:43:49)

我以前也养过这个细胞，看你的图片好像被污染了
hot_hot_hot (2012-5-21 12:44:12)

加上G418之后，有许多沉淀产生，内有空泡什么的都遇到过，但是随着试验的进行沉淀的数量会逐渐的减少，没有你图片上面那么多，怀疑室污染的问题，建议你取含有沉淀的上清空培养一下看看是不是污染。
zzzz (2012-5-21 12:44:31)

谢谢各位，但我转染了两次都有这个问题，空培养未转染的细胞是好好的，很郁闷。这两天培养上清试试。另外，如果是污染，这些黑色絮状东东是什么呢？我在库里没有见过这种形态的污染啊。。。
101010 (2012-5-21 12:46:38)

污染了吧，我以前也有过这种污染
zzzz (2012-5-21 12:47:09)

真的是污染了吗？转染两次用的是同一种质粒，而培养液同时还在养其他细胞也是好的啊！！
xueyouzhang (2012-5-21 12:47:32)

你把g418的浓度调低看看行不行。
nn255 (2012-5-21 12:47:53)

肯定是被真菌污染了