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[求助]3t3-l1分化问题求助

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-5-22 14:06    作者: wood533    来源: 分析测试百科网

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[求助]3t3-l1分化问题求助

小女子刚开始做3T3-L1分化成脂肪细胞，发现撤换胰岛素后容易卷边，不同程度都有，有的干脆全漂啊，而且分化率不高。
我用的DEX和胰岛素都是国产的，用的是小牛血清。看文献都是胎牛血清，和SIGMA的胰岛素和DEX，IBMX。
请有经验的高手现身，给小女子上上课，自己摸索着做了一阵，发现不行啊。培养一次要十几天，看他们漂，我也很难过，而且实验没法推进下去，也比较急。

谢谢做过的达人出来传授下经验，在此先谢谢了，呵呵。
为这些细胞分化，觉也睡不好，怕自己毕不了业
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最新回复

  • abc816 (2012-5-22 14:07:00)


    首先换培养液的时候要小心点。
    分化诱导时，如果分化两次则细胞贴壁比较紧。

  • wood533 (2012-5-22 14:07:27)


    请问楼上的，分化2次是指加二次诱导剂嘛？谢谢

  • dongdongqiang (2012-5-22 14:07:43)


    我认为是的，两次诱导

  • dongdongqiang (2012-5-22 14:08:10)


    偶也在做，觉得操作时一定要小心，否则养了好久的细胞就挂了，很是心疼。试剂嘛，这个试验，最好用进口的，国产的不能保证质量。

  • 3648755 (2012-5-22 14:08:30)


    可以直接分化诱导3天，也可以在第二天时换液,再分化诱导2天.

  • wood533 (2012-5-22 14:08:48)

    楼上的再请教一下，按照你说的方法加了2次诱导剂，倒是不卷了，但是出现了一团一团的细胞，并且出现棘装的细胞，以前加一次诱导剂的时候没有的。请问啥原因啊？不胜感激，万分谢谢！！！

  • nn255 (2012-5-22 14:09:09)


    请问您还在培养3T3-L1细胞吗?能否分我一瓶?谢谢!

  • guagua (2012-5-22 14:09:26)


    出现棘状后，更换细胞液继续作分化诱导促进没有？继续分化促进4天左右，看能否出现脂肪滴。

  • fei1226com (2012-5-22 14:09:44)


    有条件的话还是换新的细胞重新培养吧。
    我也遇到过，虽然分化诱导3天后面能有脂肪细胞，但是分化的不是太好。

  • wood533 (2012-5-22 14:10:02)

    继续诱导了，但是状态明显不对了，就像染菌一样。结果在造模时候根本就不成功。

  • vera+ (2012-5-22 14:10:20)

    我的情况跟你的一样，我的在加insulin 后就全部飘起来了，不知道是什么原因，我重复了好几次，最后多是飘起来的，不知道你现在问题解决了没有，给我点经验，我还要靠这个实验毕业的，所以比较郁闷，希望你能给我回下帖，帮我看看是什么原因好么，我先谢过了．
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