[求助]请教关于MTT

最新回复

• duoduo (2012-5-24 12:22:08)

  
  用DMSO溶解之前 要先将上清吸掉。。
  然后加入DMSO，充分震荡，使结晶物充分融解。
  PS:个人感觉在一些情况镜下观察与MTT值做出来不吻合，可能你的药物是其他通道作用细胞。

• zhezhe (2012-5-24 12:23:16)

  没太明白你后一句的意思，我只是想知道酶标仪测OD值时是否需要将其从96孔板转移到酶标板中，可不可以直接用96孔板测量？
  
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  用DMSO溶解之前 要先将上清吸掉。。
  然后加入DMSO，充分震荡，使结晶物充分融解。
  PS:个人感觉在一些情况镜下观察与MTT值做出来不吻合，可能你的药物是其他通道作用细胞。

• duoduo (2012-5-24 12:23:41)

  
  直接测量就好了
  注意要保持你培养板底部的清洁。如果不清洁，会影响你的实验结果。
  你是悬浮细胞还是贴壁细胞？

• zhezhe (2012-5-24 12:24:03)

  我的是贴壁细胞
  可是各孔底部长满了细胞，会不会影响结果呢？
  
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  直接测量就好了
  注意要保持你培养板底部的清洁。如果不清洁，会影响你的实验结果。
  你是悬浮细胞还是贴壁细胞？

• duoduo (2012-5-24 12:24:44)

  
  我不清楚你当时每孔传了多少细胞，
  如果细胞长的很满并且空白对照组已经有细胞死亡，无疑你的结果不准确。
  所以你要掌握好你细胞的量，以及选择测定MTT的最佳时间。
  祝你成功！

• zhezhe (2012-5-24 12:25:12)

  我是每孔2000个细胞，待我测定时是没有完全长满，但是底部只要有细胞是否也会影响结果呢？
  
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  我不清楚你当时每孔传了多少细胞，
  如果细胞长的很满并且空白对照组已经有细胞死亡，无疑你的结果不准确。
  所以你要掌握好你细胞的量，以及选择测定MTT的最佳时间。
  祝你成功！

• vvmmoy (2012-5-24 12:25:42)

  最基本的MTT步骤要清楚：
  1. 加MTT溶液。
  2. 培养箱内放置4h。
  3. 弃掉上清。
  4. 加DMSO溶解。
  5. 酶标仪检测。
  
  在第四步加DMSO之前，活细胞吸收MTT染料后已死亡，但仍贴附在皿底。加DMSO后，细胞骨架及其内染料均完全溶解，皿底已经没有细胞贴附了。因此，可直接酶标仪检测，不会对结果有影响。
  
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  我是每孔2000个细胞，待我测定时是没有完全长满，但是底部只要有细胞是否也会影响结果呢？

• BOSS2011 (2012-5-24 12:26:08)

  那悬浮细胞加CCK-8测量OD值时,加CCK-8培养 4小时后要不要把细胞离心后再把上面的液体吸出来测量OD值?

• ladyhuahua (2012-5-24 12:26:31)

  
  
  PS:个人感觉在一些情况镜下观察与MTT值做出来不吻合，可能你的药物是其他通道作用细胞。
  
  是什么意思，能说的明白点吗