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[求助]A549细胞的生长特性
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有没有养A549细胞的战友？能不能提供A549细胞多久一代？是不是生长比较慢啊？我是在中科院买的细胞，一瓶传了3瓶，长了一周才长满。我冻存是一瓶冻一冻存管，已经传了2代，今天消化时忘了提前准备胰酶，胰酶是临时融化的，我吸时还没化完，发现消化比原来慢好多啊，有的还消化不下来，谁知道是怎么回事？细胞问题还是胰酶问题？热心的朋友帮帮我啊。
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最新回复
ladyhuahua (2012-5-24 15:25:59)
1、A549是肿瘤细胞，长得很快的，我用25cm2的培养瓶，三天就很满，培养基会变黄，再不传代就不太好了。
2、另外，胰酶的消化温度最适是37度，虽然你临时融化，加到培养瓶后应在孵箱中放置一会，或在手心焐一会，在显微镜下观察消化效果合适后再终止。
3、如果你的细胞长得时间太长，比如你说的一周，细胞太老了，也是不好消化的一个潜在原因。
4、在排除以上原因后，是否胰酶失效？或者往胰酶中添加一定浓度的EDTA，这样消化能力会增强。
但是生长缓慢的原因还是要查出来，以免影响后续实验！
viviwang1987 (2012-5-24 15:26:20)
我正在养A549细胞，生长特快，可能是我分瓶时密度过大，一般1－2天就铺满瓶底到80－90％，我是2天就传代了，下次可能还要多分几瓶。文献说是按1：3－1：8传的。
ladyhuahua (2012-5-24 15:26:45)
viviwang1987 (2012-5-24 15:27:06)
我用的是RPMI1640的培养基，血清浓度10%，虽然细胞长的比较慢，但是好像没有感染的迹象，因为培养液还是清的，而且每天细胞数量都在增多，除了那天胰酶消化的速度比较慢，以后就很正常了。我觉得是不是血清浓度有点低呢？
qumm1985 (2012-5-24 15:27:22)
各位可有做过A549的转染么？
转染效率高么？
比如用lipo2000...
bananapeople (2012-5-24 15:27:46)
milkdog (2012-5-24 15:28:06)
我前几天也在养A549细胞，用RPMI1640的培养基，血清浓度也是10%，胰酶消化慢 可能是太冷的原因
jujuba (2012-5-24 15:28:46)
我前几天也在养A549细胞，用RPMI1640的培养基，血清浓度也是10%，胰酶消化慢 可能是太冷的原因
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