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[求助]请教Annexin V/PI双染流式测细胞凋亡
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请问流式高手,这种方法是否可以测混合细胞的凋亡?
Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒打开后,是不是必须一次使用完?可否分次使用?若能分次使用如何储存?
哪些公司的此种试剂盒质量较好?
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-5-29 12:41 作者: ritou1985 来源: 分析测试百科网
最新回复
911 (2012-5-29 12:41:35)
cj_mondy (2012-5-29 12:42:09)
Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒打开后,不必一次使用完,可以分次使用,一般储存在4度左右即可,只是要注意要蔽光保存。我们实验室用过凯基的试剂盒,效果还可以。
混合细胞的凋亡是可以测的。因为不管是什么细胞,它只要是早期凋亡就可以被Annexin V染色,凋亡到晚期或者死亡就可以被PI染色。这一点是细胞的通性,所以测混合细胞的凋亡是没有问题的。
BUK (2012-5-29 12:42:32)
Annexin V-FITC探针是肯定是4度避光保存,不能冻,打开后也可以用的,我们这里用的是mp公司的,很好,而且我喜欢稀释一定倍数使用,毕竟价格比较贵嘛,但也不是无限稀释,而且用配套的稀释液稀释(其实就是hepes缓冲液)。实际上,探针染料等产品最好都用mp的,质量稳定,而且售后可以。曾经有山东的园友买的国产的,就是染不出来,荧光显微镜也是不好,所以有些没有结果也要考虑试剂问题。
每样加5ulav,和10ulpi(10mg/ml)10分钟,然后根据细胞数加pbs上样检测(100ul)
但我不明白你用混合细胞的话,必须保证所有样比例一致,否则需要的那个不需染色的标定组,很难做对照。后面测得样品就不准了,就需要经验调整参数。
tieshazhang (2012-5-29 12:43:00)
我最近研发的Annexin V-FITC&PI质量也很好,欢迎大家使用!
bananapeople (2012-5-29 12:43:26)
每样加5ulav,和10ulpi(10mg/ml)10分钟,然后根据细胞数加pbs上样检测(100ul)
但我不明白你用混合细胞的话,必须保证所有样比例一致,否则需要的那个不需染色的标定组,很难做对照。后面测得样品就不准了,就需要经验调整参数。
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我做的试临床实验,收集类风湿关节炎患者的关节液,离心取单核细胞,分实验组和对照组培养,观察细胞凋亡的情况。收集一例关节液作一次,这种实验方法合适吗?
bananapeople (2012-5-29 12:43:55)
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mp公司全称是什么,哪儿可以定到?
okhaha (2012-5-29 12:44:22)
我最近想买凋亡试剂盒,不知道什么牌子的好,希望有经验的提供,多谢谢
66小飞侠 (2012-5-29 12:45:28)
我最近想买凋亡试剂盒,不知道什么牌子的好,希望有经验的提供,多谢谢
ffooll (2012-5-29 12:46:35)
Moleculer Prober分子探针
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