[求助]巨噬细胞原代培养

最新回复

• DDD (2012-5-29 14:59:09)

  
  建议买个细胞株好了，干嘛费事原代培养。如小鼠的RAW264.7，Ana－1，大鼠NR8383，人THP-1等。

• cocacola (2012-5-29 15:00:03)

  
  用不着洗的这么麻烦吧，取出细胞后洗3次就接种的瓶子里，待其贴壁后换页，去处不贴的细胞就是了。 你的步骤太多了，是不是把巨噬细胞损伤了

• utt0989 (2012-5-29 15:00:30)

  用不着洗的这么麻烦吧，取出细胞后洗3次就接种的瓶子里，待其贴壁后换页，去处不贴的细胞就是了。 你的步骤太多了，是不是把巨噬细胞损伤了
  
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  我就是取出来后PBS洗两次就用培养基重悬了，贴壁后再换液，可一换液就不行了。。。

• utt0989 (2012-5-29 15:00:50)

  建议买个细胞株好了，干嘛费事原代培养。如小鼠的RAW264.7，Ana－1，大鼠NR8383，人THP-1等。
  
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  我要的是做了模型的动物细胞，没办法得自己养原代

• gogo (2012-5-29 15:01:10)

  
  你用不完全培养基洗看看呢，原代贴壁的细胞过一段时间会有一部分细胞又飘起来，我觉得应该没什么事，至少我们实验室养单核细胞都有这样的情况

• utt0989 (2012-5-29 15:01:37)

  
  我拿两只小鼠做了下实验，还是用PBS洗，6h后换液，长的还不错，放两天都没事，可能是刚从体内取出来的原代细胞适应体外环境得一段时间，以后我也放长点时间再换液好了
  谢谢大家出谋划策哈

• flower-201 (2012-5-29 15:02:29)

  
  你可以用低密度的蔗糖吸附巨噬细胞，然后用1500－2000rpm离心就行了，操作注意不要污染，这样可以收集到多的细胞哦！

• qqq111 (2012-5-29 15:02:58)

  QUOTE:

  原帖由 flower-201 于 2012-5-29 15:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  你可以用低密度的蔗糖吸附巨噬细胞，然后用1500－2000rpm离心就行了，操作注意不要污染，这样可以收集到多的细胞哦！

  请问低密度的蔗糖是怎样使用的？是在腹腔灌洗的过程用，还是在贴壁中用阿？我提取小鼠腹腔巨噬细胞好几次了，都没成功，真心盼望成功人士指点一下阿

• 49888 (2012-5-29 15:03:20)

  
  你为何不用淋巴细胞分离液去红，去红后你直接孵育贴壁不行吗，你用PBS洗细胞是为了取出红细胞溶体，还是为什么？
  我提取巨噬细胞可是直接用分离液分离，然后直接贴壁，没你这么麻烦，效果也比较理想。

• one (2012-5-29 15:03:40)

  
  说一下你破红的方法，我用过3ml冰冷的蒸馏水作用30s，在加0.6M的kCl恢复张力，离心，用培养基重悬，培养。没有出现过细胞死掉的情况。

• HPLC使者 (2012-5-29 15:04:01)

  请问：购买巨噬细胞细胞株，知道北京哪里可以买到吗，有联系方式吗。多谢

• kuaizige (2012-5-29 15:04:34)

  大鼠腹腔液巨噬细胞老是污染主要是没有消毒好