[求助]今天的DMEM配的不好

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• dotaaa (2012-5-30 16:34:36)

  QUOTE:

  原帖由 知了知了 于 2012-5-30 16:34 发表
  
  
  我用GIBICO的培养基，干粉，一升加2.0g的碳酸氢钠加完PH7.59.我调到了7.25然后过滤除菌，除完后成了8.03了，不知怎么回事，我用的是注射滤器，手都酸了，但是累点不要紧，细胞还能用吗，高手指点一下，是什么原因啊。***作有什么值得注 ...

  PH计好像不能用双蒸水冲

• 8s5g (2012-5-30 16:35:00)

  QUOTE:

  原帖由 知了知了 于 2012-5-30 16:34 发表
  
  
  我用GIBICO的培养基，干粉，一升加2.0g的碳酸氢钠加完PH7.59.我调到了7.25然后过滤除菌，除完后成了8.03了，不知怎么回事，我用的是注射滤器，手都酸了，但是累点不要紧，细胞还能用吗，高手指点一下，是什么原因啊。***作有什么值得注 ...

  我们都是用蒸馏水的阿，没事啊

• qhyu (2012-5-30 16:35:17)

  
  一般PH调7.1~7.2
  你调的时候跳到7.0或者6.9
  等你滤完差不多刚好
  我就是这么做的 我也是用注射器滤 确实累

• kuaizige (2012-5-30 16:35:34)

  
  ph计先要使用缓冲溶液调整的，
  想你已经调好以后使用的吧？
  还有可以使用双蒸水吧，
  不过我一般是三蒸水的。
  一般是7.4，
  那么我就调到7.1～7.2之间，
  然后过滤就可以了！
  我认为你的8多偏高了，
  培养液不是宁酸勿碱啊！
  最好还是别用了，但是必须找到原因啊！

• 铜雀 (2012-5-30 16:36:11)

  因为缓冲系统是CO2-HCO3-,当你过滤时CO2挥发了一部分,所以成碱性,建议过滤后调PH值

• jujuba (2012-5-30 16:36:31)

  
  培养液在过滤除菌后PH都会上升，所以在过滤前调PH时要比期望值低0.1~0.2左右，PH稍高一点没有台大关系，只要在二氧化碳孵箱里培养就可以。

• xevin (2012-5-30 16:36:48)

  过滤时间太长，CO2跑光了，PH自然会上升。
  
  用1N的无菌HCL调下来就可以了，不会有什么影响。

• 了了 (2012-5-30 16:37:12)

  
  干粉溶解之后加水到1L，然后用HCL或者NaHCO3调节pH7.1~7.2之间，正如littlefairy2005所说的，过滤之后一般pH会上升0.2左右。可以考虑加HEPES进去，缓冲能力比较强，在使用期内PH比较稳定。
  pH计的使用楼主可能得注意，如果是PHS-2C型的，应该是用两个标准液调节，一个定位一个调斜率。稳定之后用三整水冲洗干净就可以测培养基的pH了。